BCA protein assay试剂盒是检测蛋白浓度的原理是什么

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：生物作业时间：2024/05/01 04:56:54

BCA实际盒我用过,确实比考马斯亮蓝试剂要灵敏多了.操作也很简便
原理简介
BCA(bicinchoninic acid)法蛋白浓度定量试剂盒是在世界上常用的蛋白浓度检测方法之一BCA法基础上改进而成.众所周知,二价铜离子在碱性的条件下,可以被蛋白质还原成一价铜离子（biuret reaction）,一价铜离子和独特的BCA Solution A（含有BCA）相互作用产生敏感的颜色反应.两分子的BCA螯合一个铜离子,形成紫色的反应复合物.该水溶性的复合物在562nm处显示强烈的吸光性,吸光度和蛋白浓度在广泛范围内有良好的线性关系,因此根据吸光值可以推算出蛋白浓度.
产品特点
1．步骤简单,45分钟内完成测定,比经典的Lowry法快4倍而且更加方便.
2．灵敏度高,检测浓度下限达到25μg/ml,最小检测蛋白量达到0.5μg,待测样品体积为1-20μl .
3．BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的去污剂等化学物质的影响,可以兼容样品中高达5%的SDS,5%的Triton X-100,5%的Tween 20,60,80.
4．在20-2000μg/ml浓度范围内有良好的线性关系.
5.检测不同蛋白质分子的变异系数远小于考马斯亮蓝法蛋白定量.
再问：你好，谢谢你的回答。不过还有几点疑问： 1、蛋白质在碱性条件下可以将二价铜离子还原为一价铜离子，是什么基团导致的呢？是二硫键么？ 2、每个蛋白质的序列都不一样，如何根据摩尔浓度推测蛋白质质量呢？ 3、在一篇文献上看到用这种方法可以测蛋白酶解后的总多肽含量，如果是二硫键起到了还原作用，那酶解后的多肽应该就不存在此种功能了，对这一点很是疑惑啊。。。不过要是能附上产品说明书就更好啦O(∩_∩)O~
再答： 1.这个我没有了解那么深，不过有本书里应该有《蛋白质与蛋白质组学实验指南》，可以参考下。 2.http://www.beyotime.com/p0012s.htm 这是碧云天的BCA的说明书

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