为什么我做Western,电泳时预染Marker很值条带也很清晰,但是转膜后膜上的预染Marker就变的很歪,非常歪.并

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：综合作业时间：2024/05/09 13:27:16

为什么我做Western,电泳时预染Marker很值条带也很清晰,但是转膜后膜上的预染Marker就变的很歪,非常歪.并且条带特别的不清晰,根本看不出条带!求教~

你好!
我也做western有一段时间了
很高兴和你探讨下这个问题
我觉得该现象很可能的原因是转膜过程中出问题了,
即
1、转膜后的mark非常歪的原因是胶、膜以及滤纸（三明治组合）之间气泡没赶干净导致的.
2、而条带特别不清晰就得看你的转膜时间了：
转膜时间不够会导致胶上的蛋白包括mark没有完全转到膜上,
转膜时间长了会导致胶上的蛋白包括mark已经穿过膜到滤纸上了.
建议电泳后胶进行考马斯亮蓝染色、转膜后的膜进行丽春红染色以进行逐步检验问题出在哪.

为什么我做Western,电泳时预染Marker很值条带也很清晰,但是转膜后膜上的预染Marker就变的很歪,非常歪.并为什么我做Western,电泳时预染Marker很值条带也很清晰,但是转膜后膜上条带都没有了 pcr电泳结果特别不清晰,条带很模糊连MARKER也看不清上样孔很亮,不加任何东西的上样孔都很亮我跑出来的PCR目的条带很清晰,但是marker很暗,每个加样孔都一样的暗 Western blot实验电泳时 Marker条带不清晰,很弥散,无法辨别有几条带,请问什么原因可以导致啊? 做Western Blot 跑电泳之后的胶上Marker的条带,比较清晰,但与模板Marker的条带却对应不上,而且少一 pcr电泳带看不清楚我们一共四个组做了这个实验,marker很清晰,就是我们的结果都没有或者是看不清,这是怎么回事,除了做western的时候,为什么转膜后膜上marker有时候深有时候浅? PCR产物电泳检测结果点样孔很亮,没有目的条带.是什么原因?marker的条带正常. western blot marker的作用? 我初学蛋白质电泳试验,对这张蛋白质电泳图不知怎样看,分析?请问图中MARKer的每条带的数值是多少?SDS PAGE蛋白做western,彩色的marker跑的胶上了,考马斯亮蓝没染出样品的蛋白条带.是样品的问题还是胶有问题?