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PCR 内参 跑胶我跑半定量PCR的时候,内参出来的亮度不一致,有的 泳道很亮,有的暗一些,那我这张图还可以用吗,因为有

来源：学生作业帮 编辑：作业帮 分类：综合作业 时间：2024/05/28 12:21:35
PCR 内参 跑胶
我跑半定量PCR的时候,内参出来的亮度不一致,有的 泳道很亮,有的暗一些,那我这张图还可以用吗,因为有人说内参的亮度应该保持一致?不是只要比目的基因和内参的灰度值来比较就可以的吗?
如果按理论算的话,电泳条带亮度的不同代表起始浓度的不同,但是,你要知道,DNA模板浓度达到一定程度之后,PCR产物亮度和起始模板浓度并不是完全成正比的.
如10^7次方的模板和10^8次方的模板PCR的产物电泳亮度可能区别就不是很大,也就是扩增效率会随着模板浓度的变化而变化.
所以我们要尽量使内参的条带亮度一致,以保证模板浓度一致,这样就尽量可以使各个不同模板之间在扩增目的基因时的扩增效率一致.
PCR 内参 跑胶我跑半定量PCR的时候,内参出来的亮度不一致,有的 泳道很亮,有的暗一些,那我这张图还可以用吗,因为有 为什么我的RT-PCR内参跑不出来.目的条带到是跑出来了 还想再向您请教下 关于荧光定量PCR 相对定量内参基因的选择,如果我想用18SrRNA,我该怎么得到这个内参呢 我准备做定量PCR,需要检测的基因大约有10个左右,请问我需要多少个内参基因?只用1个内参行不行? RT-PCR内参电泳跑不出来 实时定量pcr内参以及相对标准曲线的问题 请问我在做荧光定量pcr的时候内参的ct值很低大约在35左右,而目的基因ct值在25左右 我现在要做荧光定量PCR,有3个目的基因,以ACTIN基因作为内参,分析其在根茎、根、茎、叶的表达情况, 我做的RT-PCR怎么样让内参一致?刚入门 老板让做内参的条件 反复做也没有要P出来的目的条带 我的退火温度是55 可以 半定量rt pcr内参和目的基因的引物加的量相同吗,能否放在同一管中跑PCR 请问荧光定量PCR进行相对定量时,若是目的基因和内参基因扩增效率不一致,为什么会导致结果的不准确? 实时荧光定量pcr内参是什么东西