关于金银花荧光定量试验中的内参基因选择问题!

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：综合作业时间：2024/05/07 19:12:02

关于金银花荧光定量试验中的内参基因选择问题!
求助,我要做一个关于金银花定量实验,不知道怎么选择内参基因,同学告诉我说要先筛选几个内参,内参基因可以直接去生物公司合成,不知道内参基因的序列在所有植物中都是一样呢,还是不同的植物会不一样,如果不一样,那怎么才知道自己实验材料中的内参基因序列?谢谢各位大侠!

直接在NCBI里面查找金银花的内参基因,如果没有的话,就找与金银花同种属植物的内参基因.我做过猪的,在NCBI里查不到猪的内参基因,我就用的小鼠的,因为是持家基因,所以在哺乳动物里面表达的差异不大,也可以做出来.所以你可以试一下.

关于金银花荧光定量试验中的内参基因选择问题! 还想再向您请教下关于荧光定量PCR 相对定量内参基因的选择,如果我想用18SrRNA,我该怎么得到这个内参呢荧光定量pcr扩得出目的基因但是检测不到内参gapdh 实时荧光定量pcr内参是什么东西不同阶段的荧光定量实验都需要做目的基因及内参基因的标准曲线吗荧光定量数据处理时内参的CT值低于目的基因的CT值,那应该怎么进行处理啊? 请问荧光定量PCR进行相对定量时,若是目的基因和内参基因扩增效率不一致,为什么会导致结果的不准确? ,第一次做荧光定量PCR,内参基因可以跑出来,但是荧光峰度比较低,溶解曲线也不错,但目的基因完全跑不出我现在要做荧光定量PCR,有3个目的基因,以ACTIN基因作为内参,分析其在根茎、根、茎、叶的表达情况, 第一次做荧光定量PCR,内参基因能够跑出来,而且溶解曲线也比较好,但是目的基因完全跑不出来请问我在做荧光定量pcr的时候内参的ct值很低大约在35左右,而目的基因ct值在25左右我要做荧光定量PCR,测细胞因子mRNA,要测三种因子,是否是把三种引物和内参基因引物分别加入到四个体系中