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关于 克隆的问题.假如我有有一个基因片段,未知序列.我可以把它连接到T载体,然后PCR

来源：学生作业帮 编辑：作业帮 分类：历史作业 时间：2024/05/06 10:49:01
关于 克隆的问题.假如我有有一个基因片段,未知序列.我可以把它连接到T载体,然后PCR
PCR 用T载体PRIMER,然后测序,然后酶切出片段---------》从而达到得到很多此片段的目的.这个做法行么?或者别的做法,推荐下
T载体分两种.一种是末端带有A的典型的T载体,这样的T载体可以与taq酶扩增出来的片段连接,另一种是平末端的T载体,这种T载体末端没有A,它用于以pfu或者是phusion这样的高/超保真酶扩增出来的片段的连接,因为你的序列是未知的,为保万无一失,建议你最好先用taq给它处理下,即末端加A然后再和含有A的T载体连接,然后再用M13测序.
关于 克隆的问题.假如我有有一个基因片段,未知序列.我可以把它连接到T载体,然后PCR 双酶切老是切不完全我PCR克隆了一段200bp的基因片段,然后连接到了T载体,引物2端各有EcoRI和HindIII的酶 知道一个基因两端的序列,中间有一段未知,用哪种PCR法把未知片段扩增出来啊? 你克隆过未知的基因吧?我也要克隆一个未知基因.我有以下疑问：1,我克隆鱼的一个未知基因. 目的基因未连接到克隆载体上这是为什么?我用的克隆载体是PMD-18! 你克隆过未知的基因吧?我也要克隆一个未知基因.我有以下疑问：1,我克隆鱼的一个未知基因.我该找多少生物的该基因来比对找保 为什么我的目的基因连接克隆载体转化、提质粒后,酶切鉴定正确,而质粒PCR和菌液PCR鉴定都不正确呢?着急 我做TA克隆,准备拿序列去测序.做完转化以后直接做个菌液PCR检验一下是否有目的条带就可以了吧?因为我的胶回收目的片段比 目的基因片段与载体DNA连接的主要有? 关于PCR克隆基因的引物问题 克隆一个未知的基因拿到序列需要多久? 我克隆了一个基因,序列与参考序列完全一致,我克隆的这个序列还有没有必要提交到NCBI上?