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我做TA克隆,准备拿序列去测序.做完转化以后直接做个菌液PCR检验一下是否有目的条带就可以了吧?因为我的胶回收目的片段比

来源：学生作业帮 编辑：作业帮 分类：综合作业 时间：2024/04/25 21:49:21
我做TA克隆,准备拿序列去测序.做完转化以后直接做个菌液PCR检验一下是否有目的条带就可以了吧?因为我的胶回收目的片段比较单一且比较亮.但老师说要蓝白斑筛选重组子.IPTG和X-gal.因为我没配过这东西.看能不能省掉呢?没有分了.谢谢义务分享经验.
可以的,菌液PCR如果条带正确也是可以的

没加IPTG和X-gal的话就分不清是否是空载体还是已经转入基因了
我做TA克隆,准备拿序列去测序.做完转化以后直接做个菌液PCR检验一下是否有目的条带就可以了吧?因为我的胶回收目的片段比 我的目的片段连载体后,挑单克隆摇菌,用菌液PCR,没有条带. 单克隆验证,菌液PCR有目的条带的位置,但是质粒PCR后,却没有批出我的目的条带这是为什么呀 为什么我的RT-PCR内参跑不出来.目的条带到是跑出来了 PCR目的条带的问题, 大侠们,我现在做PCR,用的是师姐设计的引物序列,怎么才能知道目的基因片段的大小 我构建的穿梭载体,连接好后进行双酶切和PCR两个途径的检测,结果酶切没有条带显示,而PCR确有目的条带! 关于 克隆的问题.假如我有有一个基因片段,未知序列.我可以把它连接到T载体,然后PCR 转化后菌液pcr有目的条带,然后提质粒和双酶切验证.但是没有得到目的条带. 菌落PCR有关问题?我们做了转化实验,将转化后的菌涂在含Kan抗性的平板上,为什么挑取能生长的菌落做PCR没有目的条带? 为什么我的目的基因连接克隆载体转化、提质粒后,酶切鉴定正确,而质粒PCR和菌液PCR鉴定都不正确呢?着急 基因工程得到目的基因,反转录+pcr后用电泳检测,到底能检测出什么?电泳检测后就直接可以做克隆载体dna?