请教如何计算出兼并引物的退火温度

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：化学作业时间：2024/05/04 12:02:38

请教如何计算出兼并引物的退火温度
我是一个新手,如何根据公司送来的兼并引物的单子上的Tm值推出实际PCR时的退火温度呢?引物单子上有两个Tm值,分别是1M 钠离子,50mM钠离子条件下的Tm值.实际PCR时的退火温度怎么算呢?

实际pcr的退火温度一般都是从55℃开始的,有杂带退火温度就提高一点,目的带比较微弱退火温度就降低一点,不用管那个引物单子上的温度,那样太麻烦,有的实验室一天做几百个样品的pcr,如果个个要看引物单子上的温度然后在设计条件,你想想看,那得用多少台pcr仪器啊,所以一般都取默认条件,55℃30s

请教如何计算出兼并引物的退火温度 ISSR-PCR引物的退火温度问题如何用PCR技术检测酵母菌?如何选择引物?变性、退火、延伸的温度设置为多少比较合适,Buffer? 为什么做PCR设定引物退火温度时设定的退火温度要比合成引物得到的引物Tm值低几度? 上下游引物退火温度分别为47、49℃,如何设置温度梯度PCR最合适设计引物的时候上下游引物的退火温度分别是56.9和56摄氏度,PCR时退火温度应选多少度! 引物的退火温度如何计算,用tm值减去5度,靠谱不?用1m na+的还是50mmna+? RT-PCR,自己前后引物Tm差7度,前引物63度,后引物58度,退火温度如何设置? 用primer 5.0 设计引物的时候,哪个才是真正的PCR产物退火温度 PCR过程中引物的碱基数量与种类和退火温度有什么关系? 请教如何计算引物的Tm值? 退火温度与引物的TM值有什么联系?为什么退火温度要比TM低5度左右最合适?