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为什么做PCR设定引物退火温度时设定的退火温度要比合成引物得到的引物Tm值低几度?

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/18 23:45:28
为什么做PCR设定引物退火温度时设定的退火温度要比合成引物得到的引物Tm值低几度?
Tm指的是把DNA的双螺旋结构降解一半时的温度.我们PCR时候,当然不能用Tm值来作为退火的温度.一般来说,退火温度比Tm值要低上5度左右.但是这个也不是绝对的.建议你如果说模板比较充足的话,做一个梯度试验.范围在Tm值周围10度左右,如果说在这个范围内可以得到一个明显的结果就可以确定.如果说仅仅看到一个趋势,那么你还需要继续扩大这个梯度的范围来确定.