作业帮哪个T载体上没有SacI和BamHI这两个酶切位点?现在需要连T,但是Pcr引物两端加了SacI和BamHI这两个酶切位
来源：学生作业帮 编辑：作业帮 分类：生物作业 时间：2024/05/15 19:37:52
哪个T载体上没有SacI和BamHI这两个酶切位点?现在需要连T,但是Pcr引物两端加了SacI和BamHI这两个酶切位点,所以需要找一个合适的T载体.
Takara公司的pMD19T simple载体,货号为3271.
T-Vector
pMD19 (Simple) 是两侧的3’ 端添加了 “T” 的线性化载体,因大部分耐热性DNA聚合酶进行PCR反应时都有在PCR 产物的3’
末端添加一个 “A” 的特性,所以使用本制品可以大大提高PCR产物的连接、克隆效率.本载体尽管消除了LacZ基因上的多克隆酶
切位点,但不影响β-半乳糖苷酶的正常表达,因此,PCR产物克隆后仍可以利用α-互补性进行蓝白菌落的筛选,挑选阳性克隆.由于本载体上消除了多克隆酶
切位点,克隆后的PCR产物将无法使用载体上的限制酶切下,需要在PCR扩增引物上导入合适的酶切位点.本制品中的Control Insert
(500 bp) 还可以用于Control反应.
pMD19T simple载体图谱如下：
T-Vector
pMD19 (Simple) 是两侧的3’ 端添加了 “T” 的线性化载体,因大部分耐热性DNA聚合酶进行PCR反应时都有在PCR 产物的3’
末端添加一个 “A” 的特性,所以使用本制品可以大大提高PCR产物的连接、克隆效率.本载体尽管消除了LacZ基因上的多克隆酶
切位点,但不影响β-半乳糖苷酶的正常表达,因此,PCR产物克隆后仍可以利用α-互补性进行蓝白菌落的筛选,挑选阳性克隆.由于本载体上消除了多克隆酶
切位点,克隆后的PCR产物将无法使用载体上的限制酶切下,需要在PCR扩增引物上导入合适的酶切位点.本制品中的Control Insert
(500 bp) 还可以用于Control反应.
pMD19T simple载体图谱如下：
酶切位点如何选择,我正向引物和反向引物的酶切位点选择的是BamHI,和Xho I,可以吗
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双酶切老是切不完全我PCR克隆了一段200bp的基因片段,然后连接到了T载体,引物2端各有EcoRI和HindIII的酶
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PCR之后电泳没有条带,连引物二聚体都没有?这是怎么回事了?
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49．右图为某种质粒表达载体简图,小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点,ampR为青霉素抗
RT-PCR实验 为什么RT只加反义引物PCR要加正义引物和反义引物