（2011•宝山区一模）回答下列关于基因工程的问题

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：生物作业时间：2024/05/16 19:58:38

（2011•宝山区一模）回答下列关于基因工程的问题
如图1是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线，表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图2、图3中箭头表示相关限制酶的酶切位点．

限制酶	BamHⅠ	HindⅢ	EcoRⅠ	Sma
识别序列及切割位点

（1）若对图2中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性如何变化，为什么？______
（2）图中将人乳铁蛋白基因插入质粒，可以只用EcoR I同时酶切质粒和人乳铁蛋白基因，也可以使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时酶切质粒和人乳铁蛋白基因，后一个方法的优点在于可以防止______．
（3）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入______酶．重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了______．
（4）图1过程①可采用的操作方法是______，过程②可采用的生物技术是______．过程③可采用的生物技术是______．
（5）分别从分子水平简述雌性转基因牛分泌人乳铁蛋白的过程是______．

（1）SmaⅠ识别的核苷酸序列为：

，G和C之间可以形成三个氢键，A和T之间可以形成二个氢键，所以SmaⅠ酶切位点越多G、C含量越多，氢键越多，热稳定性就越高．
（2）只使用EcoR I，则质粒和目的基因两端的粘性末端相同，用连接酶连接时，会产生质粒和目的基因自身环化；而利用BamHⅠ和HindⅢ剪切时，质粒和目的基因两端的粘性末端不同，用DNA连接酶连接时，不会产生自身环化．
（3）DNA连接酶作用是连接DNA片段，在连接质粒和目的基因时用到，而质粒本身所携带的抗性基因的目的就是供重组质粒的鉴定和选择，所以答案是筛选．
（4）过程①是将目的基因导入动物受精卵，所用方法是显微注射法；过程②是早期胚胎培养，需要利用的技术是动物细胞培养；过程③是将早期胚胎移入代孕母体中所用技术为胚胎移植．
（5）此题主要考查基因指导蛋白质合成过程，即通过DNA转录mRNA，再以mRNA为模板翻译出相关蛋白质．
故答案为：
（1）SmaⅠ识别的核苷酸序列为：

，G和C之间可以形成三个氢键，A和T之间可以形成二个氢键，所以SmaⅠ酶切位点越多G、C含量越多，氢键越多，热稳定性就越高
（2）质粒和目的基因自身环化
（3）DNA连接酶筛选
（4）显微注射法动物细胞培养胚胎移植
（5）DNA转录形成mRNA，再以mRNA为模板翻译出蛋白质

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