我PCR产物大小141bp,纯化后,连接到pGEM-T载体克隆,使用M13通用引物,扩增片段长度是多少?

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：综合作业时间：2024/05/21 06:46:41

我PCR产物大小141bp,纯化后,连接到pGEM-T载体克隆,使用M13通用引物,扩增片段长度是多少?
我想知道假如用pGEM-T通用引物M13F 5'TGTAAAACGACGGCCAGT3'和M13 RV 5'CAGGAAACAGCTATGACC3'引物进行菌液PCR,扩增出的片段大小应该是多少,具体怎么计算的?

这个问题是这个样子的：首先你要有pGEM-T载体跟你片段的序列,把他们粘贴复制到word文档里.其次,在文档里把你的片段序列编辑到载体序列中,位置要跟片段实际在质粒中插入的位置相同.然后在构建好的理论序列上查找到5‘引物的位置,标出颜色,再找到3’引物的位置,同样颜色标出.最后将5‘和3’之间的序列选中字数统计就行了.
也可以用DNAman之类的,但没这个方便.

双酶切老是切不完全我PCR克隆了一段200bp的基因片段,然后连接到了T载体,引物2端各有EcoRI和HindIII的酶是否目的基因在PCR扩增时不用在引物中加入酶切位点,就可与pGEM-T载体连接?为什么? 16S RDNA作为通用引物,用于细菌总DNA 提取后跑PCR,扩增出的片段是多少个bp呢? pGEM easy-T载体上用的M13引物序列是什么? PCR扩增时,引物是否插入载体后再复制? 关于克隆的问题.假如我有有一个基因片段,未知序列.我可以把它连接到T载体,然后PCR 菌液PCR不同条带将已扩增出来的993bp的cDNA与T载体连接,之后DH5α转化,涂平板,挑克隆!菌液PCR为何一组检 PCR引物设计问题如果我设计的引物,扩增出来的目的片段长度为200BP,但是石蜡包埋组织提取出来的DNA模板大多数在10 能不能用PCR直接扩增目的片段,然后转入表达载体,代替在克隆载体或dh5a中的扩增 TAKARA的PMD18-T载体可以用哪个通用引物验证?用了TAKARA的PMD18-T载体转入了目的片段,想用PCR验 PCR 引物设计,在扩增一个基因片段,1200bp左右,编码区1000个bp左右.由于上游引物GC含量高,我想分两段扩增 PCR中,PCV2的引物扩增后,跑电泳的条带在多少bp?