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是否目的基因在PCR扩增时不用在引物中加入酶切位点,就可与pGEM-T载体连接?为什么?

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:综合作业 时间:2024/05/07 12:57:19
是否目的基因在PCR扩增时不用在引物中加入酶切位点,就可与pGEM-T载体连接?为什么?
那要看你做什么用,如果下一步你要构建载体的话,就需要相应的酶切位点,以便下一步操作.如果不做就没必要了.
再问: 只是想送去测序...为什么可以直接连接呢?
再答: 那就没必要加酶切位点了,因为现在的聚合酶一般都会在PCR扩增完之后自动3’端加A,形成了一个粘性的末端,而你的载体是末端加的T,的粘性末端。这样运用连接体系就可以连到一起了。