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TA克隆全是阴性我把1400bp的片段连接到宝生物的PMD18-T载体上,转化后,全是白斑,但是挑了二十个全是空载体,

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:综合作业 时间:2024/06/01 04:38:45
TA克隆全是阴性
我把1400bp的片段连接到宝生物的PMD18-T载体上,转化后,全是白斑,但是挑了二十个全是空载体,
首先 先确定你用的聚合酶是否能在末端加个A(一般都有)
其次 确定PCR产物是否按要求纯化,连接操作是否按说明来
然后 确定你正确的制备了感受态的大肠
再次 确定使用了抗性培养基,确定使用了iptg诱导
最后 虽然宝生物的载体比较好用,但是还是有转化率的问题...不过20全空.肯定是你的问题了