PCR产物TA克隆,PGEM-T 载体+目的片段,那么转化挑克隆提取的质粒片段是多大?

为什么我的目的基因连接克隆载体转化、提质粒后,酶切鉴定正确,而质粒PCR和菌液PCR鉴定都不正确呢?着急 提取的质粒跑电泳出来带很杂,目的片段1700bp,用的是pMD19—T载体,从左往右第三泳道和第九泳道是空质粒 能不能用PCR直接扩增目的片段,然后转入表达载体,代替在克隆载体或dh5a中的扩增 我的目的片段连T载体后,挑单克隆摇菌,用菌液PCR能P出目的片段,再提质粒用Ecor1做酶切,片段变小怎么回 我做TA克隆,准备拿序列去测序.做完转化以后直接做个菌液PCR检验一下是否有目的条带就可以了吧?因为我的胶回收目的片段比 RT-PCR怎么都没法克隆出目的片段 双酶切老是切不完全我PCR克隆了一段200bp的基因片段,然后连接到了T载体,引物2端各有EcoRI和HindIII的酶 关于 克隆的问题.假如我有有一个基因片段,未知序列.我可以把它连接到T载体,然后PCR 如果将PCR扩增的X基因片段与克隆载体连接,并转化入宿主大肠杆菌中,写出技术路线（包括基因和载体的连接、转化和鉴定）和关 TA克隆时,如何选择T载体? 目的基因片段与载体质粒的选择? PCR片段直接测序和PCR片段经克隆后测序的结果有何区别?