作业帮IPTG
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/14 14:37:38
生物中加样量如何计算?如诱导细菌表达时加IPTG至终浓度1mmol/L,不知这个到底是加多少ml或ul
先说第一个iptg的.1mmol/L其实就是1：1000.如果你有5ml的菌液,就加5uL的iptg0.5M就是0.5mol/L.你洗脱液假如是1L,那就加0.5g的氯化钠.水溶液密度都是1..所以.
加了IPTG后,细菌还能长吗?还是一点都不长?
可以生长.细菌是无法代谢IPTG的.
培养荚膜红细菌时,在1L培养基中加入1mM IPTG诱导,30°,放置摇床,218rpm,6小时后发现培养基越摇越清,w
没有做过荚膜红细胞,但是知道IPTG对细胞有一定毒性,使细胞几乎不怎么复制,而是表达产生大量蛋白,所以培养基里的细菌数量不会怎么增加,但是会不会变清不太清楚,可能是判断上的误差.
现有1M IPTG,加到5ml培养基中,使终浓度为1mmol/L ,加多少?怎么算的?不要讲述,要公式计算
加0.005ml.公式：1M*0.005ml/5ml=1mmol/L
如何通过调节IPTG的浓度和温度来控制蛋白质表达速度,从而提高蛋白的可溶性
IPTG一般浓度在0.1-1M之间可以按梯度试不同的浓度温度一般在18（这是我做过最低的温度貌似16也可以试）-37之间如果目前蛋白溶解度太低可以试试偏低浓度的IPTG和偏低的温度让蛋白表达的慢一点而
我现在用大肠杆菌基因工程菌做发酵实验,每次浊度都很高,用IPTG诱导,但产生的酶活却很低~急
我最近也正做这个,我先是用试管摇菌,然后将IPTG设为不同的梯度,最后采用了0.6M.你可以试试.另外,温度会影响表达效果,25-35度,37有点高,也祝自己顺利,早点回家过年哈~
iptg诱导完的大肠杆菌想做western blot 该如何处理菌体?
最简单的办法：取200ul菌,离心去上清,在菌体里加入50ul2%SDS,再加入16ul4Xloadingbuffer,煮上五分钟即可以上样.用超声的办法太麻烦了,特别是菌体比较少的情况.
诱导大肠杆菌表达时IPTG的量
50ug/ml,之前做过的
使用T7启动子,BL21（DE3)菌株,加入的IPTG的终浓度要到多大才能起到诱导的作用
最佳浓度是1mM,但是这样非常容易形成包涵体.如果包涵体可以用的话,比如做抗体,那么当然是蛋白越多越好,不过大多数时候我们需要蛋白的可溶性表达,所以这个浓度也需要摸索.如果你的蛋白必须是可溶性表达的话
IPTG的诱导问题我在做诱导是遇到这样一个问题,做了0小时,1,2,3,4,5小时的诱导,可是诱导的蛋白并没有随时间增加
是不是电泳上样量有问题啊?就是加过上样缓冲液后各个样品的体积不一样了