如何看跑电泳跑出的RNA条带好不好
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/12 15:02:38
存在两种可能性,第一,引物设计错误,可以将引物和参考序列进行拼接后看看能不能顺利拼接,以及拼接之后的目的片段长度;第二,可能是非特异扩增,这个时侯如果确定引物位置没有问题,可以调整退火温度,以及PCR
什么是不清楚?如果有拖带说明你电压太高了.100V跑吧如果是太淡看不清说明你点样的量不够或者PCR扩增出的浓度不高
如果用的Marker有颜色,对颜色.如果是一色的,往往是最小的那个很淡看不清.
蛋白污染会在电泳孔有亮带,跑不出来.RNA污染会在最下边,一团弥散的亮带,但DNA如果降解的话也有这种现象.
600是多在中间,还是加在一头?其他的序列还一样吗?说具体一些如果是在中间,扩增的是cDNA的话,有可能是mRNA的alternativesplicing
因为这两种RNA的相对含量啊亲.那两条带一条在3.8kb,一条在2kb,都是rRNA的一部分,本来的相对含量大概就是1:2.另外,要达到这两条带1:2的比值比较难,只要最下面弥散的带不多质量就还可以,
可能是梳子不齐,或者是胶边上和中部的厚度不一样!
首先看你的MARK亮不亮,如果MARK不亮的话说明EB少了,多加点EB.如果MARK亮的话,那就是你的PCR产物浓度不够,这个就原因多了1、增加引物浓度2、增加PCR循环数3、降低PCR退火温度以提高
PRC跑不出来先考虑是不是模板的问题,是不是DNA没有抽出来,可以把抽出来的东西跑个胶看一看.如果抽出来了,但是PCR没跑出来,就把模板浓度降低一下;如果DNA没跑出来,就要从抽提步骤上找问题.你们用
试剂盒应该没有问题,因为不久前还用,都提出来了.而且因为提不出来,就PRC跑不出来先考虑是不是模板的问题,是不是DNA没有抽出来,可以把抽出来再问:我提出来的DNA杂质太多,PCR过后电泳,拖尾现象严
用dl2000marker的话,在750bp(从上往下第三条带)和1000bp(第四条带)之间,
非特异性扩增.建议试试:1提高退火温度,或加点DMSO2重新设计引物3做分段PCR,再连起来4全基因组合成
首先,检查你的agarosegel浓度.一般以0.8%为标准(0.8g琼脂糖+100mlTEbuffer).如果你的目标片段较小(小于100bp),请适当提高凝胶浓度(1.2%-1.5%).其次,如果
总共三条带,从大到小依次是28S,18S,5S,亮度依次递减.正常情况应该是28S比18S条带亮,宽度是它的2倍,5S则很淡
提取的是总RNA的话,电泳肯定是可以看到条带的...这样的量,提取没有问题的话,直接用常规的1%-2%核酸胶就可以看到rRNA的条带(真核生物核糖体中通常含28S、18S、5.8S和5S四种rRNA;
看你提的什么DNA,基因组的话,是不好看,要是质粒,一般都会非常好看的,如果有蛋白质,点样孔会发亮并在附近有拖尾,但不影响判带的,RNA的话会比较麻烦,你可以用RNAase处理下就行了
应该会出现很多条带细胞内不仅有mRNAtRNArRNA还有一些小RNA如snRNAsnoRNAscRNA如果再加上线粒体内转录的更多
测OD的方法是测不出RNA污染的,因为RNA的260/280的值和DNA近似.电泳检测的话,主要是看RNA的含量.换而言之,实际上最相关的是你提取的时候的组织的生长状况.一般来说,如果是分生组织等提取
用琼脂糖凝胶就行,用TAE电泳缓冲液,应该是三条带,或者是抹带.再问:是和总RNA一样的条带么?再答:三条带是核糖体RNA,就是所谓的rRNA,占细胞总RNA的80%,你所说的双链RNA难道是病毒的么
当然不一样啦RNADNA都可以用EB或者genefinder蛋白的话不需要染料电泳完如果想直接再胶上看就用考马斯亮蓝染色如果要特异性的检测某个蛋白就转膜后孵育抗体然后显色