作业帮为什么要从PMD-18T上扩增基因而不是直接酶切
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/26 00:29:17
可以制品说明pMD18-TVector、pMD19-TVector是一种高效克隆PCR产物(TACloning)的专用载体.这两种载体分别由pUC18、pUC19载体改建而成,在pUC18、pUC19
PMD:=PostMortemDump,算后检查转储;=PostMortemandDiagnostic物流管理方面的.什么是PMD?恐:PMD就是个人飞行物防御系统,装备到每一个美国公民,可以击落任何
因为DNA聚合时需要3‘OH,这个只能由引物提供（没原因,就因为是那样）.这个引物是一小段RNA,引物绝对是RNA,而不是DNA.看看DNA复制需要什么酶就知道了,需要依赖DNA的RNA聚合酶（DDR
冷却的时候才能使得引物和模板结合啊.这一步也叫退火.
那要看你做什么用,如果下一步你要构建载体的话,就需要相应的酶切位点,以便下一步操作.如果不做就没必要了.再问：只是想送去测序...为什么可以直接连接呢？再答：那就没必要加酶切位点了，因为现在的聚合酶一
目的基因和载体比例最好再核对一下,连接时间放久一点试试
ATCG.原理就是体外环境模仿人体内环境,完成人体内的DNA复制,大概就这样.
这个很正常,引物本身的结构和模板的结合牢固程度,就会影响扩增的效率,导致扩增出来的片段亮度不同.
基因文库指将某些DNA导入大肠杆菌等细菌中,通过细菌的增值达到保存基因的目的.所以数量应该已经很大了,因此不需要再经过PCR扩增.
在PCR中常用的DNA聚合酶Taq只具有5‘->3’的聚合活性（当然还有外切酶活性,这里暂不考虑）
因为DNA聚合酶需要结合在双链区域,才能启动后续的脱氧核糖核苷酸的聚合作用.因此需要引物（PCR中是DNA,而生物体内是RNA）来构成双链区,从而使DNA聚合酶识别并结合,启动聚合作用.
PCR不能扩增长点的DNA分子.要先截断后PCR,再连接.PCR出来的DNA是有误差的,尤其是后面几个循环.PCR常用来检验有没有某DNA.一些重组DNA分子比较大,比如说质粒.质粒在宿主细胞可以复制
没有给你个结构图,自己看看
首先请上NCBIBLAST搜索之(blastp).或许可以直接查到你研究物种的基因序列.即使没有,有近缘物种的基因序列也是个好的参考,通过比对,选择序列保守区设计引物.若搜索不到任何信息,就需要通过设
你要扩大的是质粒不是PCR片段,直接PCR哪能扩那么大的质粒啊,而且质粒还是环形的,怎么做PCR,所以当然是摇菌啦再问：酶切后去PCR，2kb以内的质粒应该是没问题的吧？不过确实挺麻烦再答：哪有2KB
博凌科为-为你回答之前,提醒你注意一个问题,那就是先要搞清楚gene的大致概念.一般而言,一个完整gene是有起始密码子和终止密码信息的,还有各种已知的其他预示结构,所以1.不管哪个序列,你能找到起始
那是为了检测这个基因是否表达,而不是检测是否存在.只有表达的基因才会转录成RNA.
连到载体后扩增有好处：载体相对于基因组或cDNA复杂度降低,扩增出的片段纯度比较高,而且循环数可以很低,如20-25循环切忌用载体扩增时用高循环,否则会有大量smear引物肯定需要加的!mg2+倒可以
这个问题很简单,扩增序列应该称为目的基因,目的基因一般都上万bp,从两头开始当然不合适.PCR扩增只能扩增出上下游引物之间的序列,因为只有引物之间的DNA双链是解链状态的.你的问题说明你对基础知识掌握
我说说我的理解,仅供参考：你本来的意图,是通过载体线性化后,外源基因与基因组同源位点的双交换,将其整合入基因组中,对吗?如果说是整个环状质粒导入基因组,从理论上来说是有可能的,单酶切就可以了,而且概率