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做梯度PCR时,设置梯度值一般怎么结合上下游引物设?怎么让跑出的条带更特异?我一般能详细点回答更好了.

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/16 06:01:33
做梯度PCR时,设置梯度值一般怎么结合上下游引物设?怎么让跑出的条带更特异?我一般能详细点回答更好了.
我一般都是以上下游引物中最低的那个开始设,2度一个梯度,这次设计的引物特异性不高,跑出了多个条带,看怎么让条带跑的更特异些.
两个策略:1.提高退火温度;2.降低镁离子浓度.如果还不行就两个同时进行.