如何判断凝胶过滤/分子筛层析中的目标蛋白?
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/15 03:13:04
如何判断凝胶过滤/分子筛层析中的目标蛋白?
凝胶过滤/分子筛层析中,如何判断目标蛋白在波形图的哪个峰?也就是说,洗脱出来很多种蛋白,怎么知道哪一种是我想要的?急求,谢谢~
凝胶过滤/分子筛层析中,如何判断目标蛋白在波形图的哪个峰?也就是说,洗脱出来很多种蛋白,怎么知道哪一种是我想要的?急求,谢谢~
凝胶过滤是通过分子大小来分离不同的物质的,很多时候用于蛋白溶液的脱盐;对于成分分子量大小确定的蛋白溶液,可以通过比较分子量大小估计目的蛋白的洗脱时间,如果不确定各种蛋白的性质,只能接下每个蛋白峰然后鉴定~
再问: 那应该怎么通过分子量大小的比较,来估计目的蛋白的洗脱时间?能说得详细点吗?
再答: 分子量大的,不能进入凝胶内孔,洗脱时间短,分子量小的,会进入凝胶内孔,洗脱时间长,但是这是相对的,比如两个大蛋白分子,都不能进入内孔,那么他们会同时洗脱出来,不能分离,所以凝胶适用于分子量差别较大的蛋白之间的分离
再问: 那应该怎么通过分子量大小的比较,来估计目的蛋白的洗脱时间?能说得详细点吗?
再答: 分子量大的,不能进入凝胶内孔,洗脱时间短,分子量小的,会进入凝胶内孔,洗脱时间长,但是这是相对的,比如两个大蛋白分子,都不能进入内孔,那么他们会同时洗脱出来,不能分离,所以凝胶适用于分子量差别较大的蛋白之间的分离
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