蛋白质纯化,凝胶过滤层析填料

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：生物作业时间：2024/05/12 05:27:00

蛋白质纯化,凝胶过滤层析填料
我现在在做蛋白质纯化,蛋白没有标签,大小7KD,等电点8.8左右,要用凝胶过滤层析,想请问做过凝胶过滤层析的各位,用哪种填料比较好?现在已知常用的填料有交联葡聚糖凝胶,琼脂糖凝胶,聚丙烯酰胺凝胶和聚苯乙烯凝胶等.我已经知道要从蛋白大小来考虑柱子填料的规格了.

首先琼脂糖凝胶可以排除,这是大孔凝胶,用于分子量较大的成分.
我做分子筛用的比较多的柱子都是葡聚糖凝胶凝胶,我的蛋白比你的大,用G50和G100的填料,做的结果都没什么问题.
你的蛋白7kD,如果没有什么特别的性质（高级结构是球形还是其他的,有无多聚）,G50应该可以.如果你不放心,也可以考虑聚丙烯酰胺凝胶,它和葡聚糖凝胶相比更适合于分子量稍小的蛋白,可能更实用于你的实验.
聚苯乙烯凝胶没用过,不发表意见.

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