如何为一个已知基因选择合适的质粒载体(要求在哺乳动物中可以表达)
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/26 08:28:31
如何为一个已知基因选择合适的质粒载体(要求在哺乳动物中可以表达)
你是要真正在哺乳动物细胞中表达一个基因还是想以此来增长知识.
如果是实验所需,1)那么最常见的,用得最多的,也是平时我们钓到新基因第一个用的就是楼上说的pcDNA3.1(或者pcDNA3也差不多);2)如果你的目的基因有毒性,或者你对它的功能研究需要很严谨的条件,可以使用诱导表达系统(推荐Tet-Off/on系统,是一个双质粒表达),具体资料你可以上网搜一下;3)如果你的目的基因不能在原核细胞中表达,或者原核没有活性,而你又希望大量得到有活性蛋白去做功能研究,那么可以选择分泌性表达质粒(或者干脆在酵母或昆虫细胞中表达)
其实说来说去,关键在于你的目的基因及其编码蛋白自身的特性,以及你的用途.
此外还有一些小因素,例如你选择的宿主细胞等等.
自己的一点看法,有兴趣可以继续交流.
如果是实验所需,1)那么最常见的,用得最多的,也是平时我们钓到新基因第一个用的就是楼上说的pcDNA3.1(或者pcDNA3也差不多);2)如果你的目的基因有毒性,或者你对它的功能研究需要很严谨的条件,可以使用诱导表达系统(推荐Tet-Off/on系统,是一个双质粒表达),具体资料你可以上网搜一下;3)如果你的目的基因不能在原核细胞中表达,或者原核没有活性,而你又希望大量得到有活性蛋白去做功能研究,那么可以选择分泌性表达质粒(或者干脆在酵母或昆虫细胞中表达)
其实说来说去,关键在于你的目的基因及其编码蛋白自身的特性,以及你的用途.
此外还有一些小因素,例如你选择的宿主细胞等等.
自己的一点看法,有兴趣可以继续交流.
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如何以大肠杆菌质粒DNA为载体克隆一个编码蛋白的基因,并使之在大肠杆菌中表达
如何以大肠杆菌质粒DNA为载体克隆一个编码动物激素的基因,并使之在大肠杆菌中进行
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如何以大肠杆菌质粒DNA为载体克隆一个编码动物激素的基因.
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