作业帮怎么判断实时荧光定量PCR标准曲线是否准确
来源：学生作业帮 编辑：作业帮 分类：综合作业 时间：2024/05/08 17:45:39
怎么判断实时荧光定量PCR标准曲线是否准确
看标准曲线是否反映出了标准物质的真实浓度
再问： 那请问标准曲线中的R2代表什么意思？为什么说R2>0.99可信度就高？
再答： R2决定系数，英文（coefficient of determination），有的教材上翻译为，判定系数，决定系数的大小决定了相关的密切程度。当R2越接近1时，表示相关的方程式参考价值越高；相反，越接近0时，表示参考价值越低。你做了标准曲线就会归纳出一个方程式来，这个方程式的价值高低由决定系数判定。
再问： 谢谢你的解答，但我还有一个疑问，是不是说如果算出E接近0.99，同时R2>0.99，这样的定量结果可信度更高呢？
再答： 首先要解决的问题是你做这个标准曲线用的标本浓度是已知的（比如1*104、1*103、1*102、10copies/ml），然后你做出了横坐标是拷贝数，纵坐标是CT值的一个直线方程，只有这样当你扩增出一个标本的CT值时，带入方程你才能得出这个标本的拷贝数，（这才有意义，可能这些话是多余的，但是很多人做标准曲线时最基本的条件——绘制标准曲线的标本浓度不是个定值，）这时Rsq接近0.99，Eff（扩增效率）也最理想，定量结果可信度高。
再问： 那请问标准曲线中的R2代表什么意思？为什么说R2>0.99可信度就高？
再答： R2决定系数，英文（coefficient of determination），有的教材上翻译为，判定系数，决定系数的大小决定了相关的密切程度。当R2越接近1时，表示相关的方程式参考价值越高；相反，越接近0时，表示参考价值越低。你做了标准曲线就会归纳出一个方程式来，这个方程式的价值高低由决定系数判定。
再问： 谢谢你的解答，但我还有一个疑问，是不是说如果算出E接近0.99，同时R2>0.99，这样的定量结果可信度更高呢？
再答： 首先要解决的问题是你做这个标准曲线用的标本浓度是已知的（比如1*104、1*103、1*102、10copies/ml），然后你做出了横坐标是拷贝数，纵坐标是CT值的一个直线方程，只有这样当你扩增出一个标本的CT值时，带入方程你才能得出这个标本的拷贝数，（这才有意义，可能这些话是多余的，但是很多人做标准曲线时最基本的条件——绘制标准曲线的标本浓度不是个定值，）这时Rsq接近0.99，Eff（扩增效率）也最理想，定量结果可信度高。