请解释一下如何用半定量PCR检测基因的表达量,要详细的过程和这么做的原因,
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/16 14:47:16
请解释一下如何用半定量PCR检测基因的表达量,要详细的过程和这么做的原因,
情况是这样,我知道首先需要通过调内参基因到相同亮度来确定反应物的量,然后呢,怎么测出这个基因在不同胁迫条件下的表达量,那个表达量的图是根据什么画出来的,
情况是这样,我知道首先需要通过调内参基因到相同亮度来确定反应物的量,然后呢,怎么测出这个基因在不同胁迫条件下的表达量,那个表达量的图是根据什么画出来的,
我觉得你做一个实时定量吧……半定量现在谁还用啊.你要是有荧光定量PCR,就自己做.没有就送出去公司做,你要想学自己跟过去在公司看着他做.半定量多半是终点定量,重复性不好,也不是很准(话说定量PCR也有不少问题,不过最起码比半定量好).
你如果要做半定量,首先要把RNA浓度调到比较一致.内参的存在虽然可以一定程度矫正浓度的误差,不过那也是在quantity one这类图像分析软件里看的,还是可能会有人为不可避免的差别.(话说半定量有好多种设计策略,什么竞争性、非竞争性,我不知道你是不是把内参引物和目的基因引物拿到一个管子里P,或者是分开P)
最后表达量图画法很简单,你就拿你的每一个体的目的基因的丰度值减去自身内参基因的丰度,然后选则一个个体作为标准,用excel画柱状图就行了.
你如果要做半定量,首先要把RNA浓度调到比较一致.内参的存在虽然可以一定程度矫正浓度的误差,不过那也是在quantity one这类图像分析软件里看的,还是可能会有人为不可避免的差别.(话说半定量有好多种设计策略,什么竞争性、非竞争性,我不知道你是不是把内参引物和目的基因引物拿到一个管子里P,或者是分开P)
最后表达量图画法很简单,你就拿你的每一个体的目的基因的丰度值减去自身内参基因的丰度,然后选则一个个体作为标准,用excel画柱状图就行了.
请解释一下如何用半定量PCR检测基因的表达量,要详细的过程和这么做的原因,
要检测一个基因的mrna表达量用原位杂交PCR技术,哪个定量更准?
要检测一个基因的mrna表达量用原位杂交和PCR技术,哪个定量更准?
如何用PCR方法检测基因的多样性
做荧光定量PCR和半定量PCR有什么区别?半定量的PCR退火温度和荧光定量PCR是一样的吗?
简述定量PCR的原理和过程
原位杂交不能检测基因MRNA的表达量吗?不能定量吗?
半定量rt pcr内参和目的基因的引物加的量相同吗,能否放在同一管中跑PCR
我现在要做荧光定量PCR,有3个目的基因,以ACTIN基因作为内参,分析其在根茎、根、茎、叶的表达情况,
qRT-PCR检测植物miRNA的表达量,内参基因选择什么最好?可以给出特意反转录引物和qRT-PCR的引物吗?
检测基因的表达量是用western还是PCR
那位大侠能解释一下相对定量和绝对定量PCR的区别