作业帮针对高效液相色谱仪,在做含有缓冲液的流动相时,一般要冲多久的柱子?
来源：学生作业帮 编辑：作业帮 分类：综合作业 时间：2024/04/29 13:53:08
针对高效液相色谱仪,在做含有缓冲液的流动相时,一般要冲多久的柱子?
高效液相色谱仪,做完样品以后一般柱子冲多久保存柱子,我师父说,在进流动相之前,和做完样品以后,冲洗柱子.都要看基线平不平,但我问朋友,他说是根据柱长来的.
高效液相色谱仪,做完样品以后一般柱子冲多久保存柱子,我师父说,在进流动相之前,和做完样品以后,冲洗柱子.都要看基线平不平,但我问朋友,他说是根据柱长来的.
冲柱时间的长短,要看你的色谱柱.
柱长决定流动相的缓冲时间.按照标准执行,需要冲10倍的柱体积.不过如果是研发做实验,通常会节省一些时间.250mm的长柱都是至少要冲色谱柱半个小时也就够了.
反相色谱柱,比如C8和C18色谱柱会先用10%的甲醇水（或乙腈水）来过渡半小时,然后冲缓冲盐的流动相平衡进样.结束后用10%的甲醇水（或乙腈水）过渡半小时,然后用纯甲醇（或纯乙腈）保存色谱柱半小时.
这样做的主要原因是,流动相中的缓冲盐不可以直接遭遇纯有机相.因为溶解度等原因,可能会出现盐析现象.所以会用甲醇水做过渡.
你在冲流动相的时候可以观察基线,平衡后就可以进样分析.但是冲洗色谱柱的时候和基线没有关系.冲洗色谱柱主要是洗去色谱柱中残留的流动相和样品,避免他们对固定相,也就是你色谱柱的填料产生影响.
柱长决定流动相的缓冲时间.按照标准执行,需要冲10倍的柱体积.不过如果是研发做实验,通常会节省一些时间.250mm的长柱都是至少要冲色谱柱半个小时也就够了.
反相色谱柱,比如C8和C18色谱柱会先用10%的甲醇水（或乙腈水）来过渡半小时,然后冲缓冲盐的流动相平衡进样.结束后用10%的甲醇水（或乙腈水）过渡半小时,然后用纯甲醇（或纯乙腈）保存色谱柱半小时.
这样做的主要原因是,流动相中的缓冲盐不可以直接遭遇纯有机相.因为溶解度等原因,可能会出现盐析现象.所以会用甲醇水做过渡.
你在冲流动相的时候可以观察基线,平衡后就可以进样分析.但是冲洗色谱柱的时候和基线没有关系.冲洗色谱柱主要是洗去色谱柱中残留的流动相和样品,避免他们对固定相,也就是你色谱柱的填料产生影响.