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随机pcr目的片段10000以上,延伸时间多少比较合适?

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:综合作业 时间:2024/05/06 11:44:33
随机pcr目的片段10000以上,延伸时间多少比较合适?
普通taq,延伸能力是不是不太理想?另外退火温度较高,64度,也是不出条带的原因吗?
一般的taq酶速度是1kb/min.还要看是什么模板.为了避免错误扩增,最好用长片段Taq.最后一定加上10min的补加延伸时间.
再问: 直接裂解菌体粗模板,引物一个锚定一个随机,像这种大片段是不是底物也得多加点?
再答: 你说的底物是dntp吗?
再答: 直接裂解菌体的粗模板,质量不高,用来扩增这么大的片段,突变肯定很多。还是提取一下吧。