我的目的片段连载体后,挑单克隆摇菌,用菌液PCR,没有条带.

我的目的片段连载体后,挑单克隆摇菌,用菌液PCR,没有条带. 我的目的片段连T载体后,挑单克隆摇菌,用菌液PCR能P出目的片段,再提质粒用Ecor1做酶切,片段变小怎么回 单克隆验证,菌液PCR有目的条带的位置,但是质粒PCR后,却没有批出我的目的条带这是为什么呀 我构建的穿梭载体,连接好后进行双酶切和PCR两个途径的检测,结果酶切没有条带显示,而PCR确有目的条带! 我的单克隆菌落PCR除了很明确的目的条带外.在2000多上面还有微弱的两条带.不知道是什么条带.难道是菌的DNA?这样的 PCR只有引物二聚体的条带,没有目的基因条带 在做载体构建的时候,PCR时有目的条带,但是摇菌酶切没有东西,请问是怎么回事啊? PCR目的条带的问题, PCR扩增出目的片段之后为什么要酶切?酶切下来的是目的片段和载体?然后再把它们连起来?很困惑. 连接到T载体上面后,做双酶切,条带不正确,目的片段变大是什么原因 PCR筛选后发现没有目的条带 ,可是我的DH5a菌株是从含Kan的培养基上划线挑选来扩增的, PCR产物电泳检测结果点样孔很亮,没有目的条带.是什么原因?marker的条带正常.