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设计pcr体系质粒扩增扩增片段1.8kb两引物都是87碱基pfu酶怎样设计预变性 变性 退火 延伸的时间和温度我的引物g

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:综合作业 时间:2024/05/12 16:47:26
设计pcr体系
质粒扩增
扩增片段1.8kb
两引物都是87碱基
pfu酶
怎样设计预变性 变性 退火 延伸的时间和温度
我的引物gc含量大约为0.6
因为是设计的同源臂 所以比较长
你的引物怎么这么长?
预变性94℃ 5min,变性45s,退火温度看你引物是怎么设计的了.你这么长的引物估计退火温度肯定是60℃以上了.退火45s即可.72℃延伸1.5min到2min.(pfu聚合速度大约2KB/min)