重组质粒后为什么还需要双酶切、PCR鉴定并测序分析

如果PCR产物可以直接用来测序,但为什么还需要买PCR产物纯化试剂盒,还要进行连接转化提质粒酶切? 为什么我的目的基因连接克隆载体转化、提质粒后,酶切鉴定正确,而质粒PCR和菌液PCR鉴定都不正确呢?着急 转化后的重组子进行PCR,扩增出来的是目的基因还是整个质粒?为什么DNA测序是在转化后才进行? 真核重组质粒构建需要pMD18T载体么? 要克隆一段基因,什么情况用PCR,什么情况用重组质粒分子克隆法? 单克隆验证,菌液PCR有目的条带的位置,但是质粒PCR后,却没有批出我的目的条带这是为什么呀 为什么质粒PUC18携带氨苄青霉素抗性基因可以筛选重组质粒 PCR产物测序结果分析 质粒构建的过程中,如果是想把α基因与A质粒重组,但为什么要先与一个B质粒先重组再构建呢? 为什么菌液PCR 引物一个载体上的 一个是PCR片段上的 鉴定正确后 测序却完全不同?信号中断? 用相同的限制酶切割DNA分子和质粒后,用连接酶连接会有几种重组质粒形成? 我在做实时荧光定量PCR~为什么做样的时候要加入两样东西（反转录后的cDNA和质粒）