我在做实时荧光定量PCR~为什么做样的时候要加入两样东西（反转录后的cDNA和质粒）

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：生物作业时间：2024/05/16 11:19:20

不需要加质粒啊模板就是cDNA
再问：我是用PCR产物回收纯化后T载体连接~转化大肠杆菌~提取的质粒做实时荧光定量PCR~为什么老师还说要进入反转录后的cDNA
再答：你这个实验要干嘛哪有用T载体转化提质粒做real time的这个通常是用来检测mRNA表达水平的所以提了RNA后反转录成cDNA 做模板来检测提的质粒做普通的PCR 看看东西有没有连进去还差不多。。。
再问：质粒做了普通PCR了~东西进去了~做real time 是为了做标准曲线~
再答：哦哦那就是拿质粒作为标准品 cDNA是为了检测目的基因表达量呗真正要检测的是cDNA
再问：能说的详细点嘛~我有点不清楚
再答：你这个实验应该是检测某个目的基因的表达量检测的是mRNA水平提了总RNA后反转录成cDNA 然后做real time检测 real time要想完全定量就必须有标准品你这是拿连了该目的基因的T载体质粒作为标准品了

我在做实时荧光定量PCR~为什么做样的时候要加入两样东西（反转录后的cDNA和质粒）请问,我反转录时设置了2个循环,cdna还可以做半定量PCR吗?Actin的pcr在500bp单一条带. 普通的RT-PCR 和荧光定量PCR,在反转录这一步是不是一样的? 反转录PCR和荧光定量PCR 荧光定量PCR和实时荧光定量PCR的区别? 实时定量pcr的mRNA起始量必须一样吗?1ug和2ug的mRNA反转录成cDNA不能用来比较吗? PCR-DGGE和实时荧光定量PCR有啥关系呢?为什么在一个实验里之前做了PCR-DGGE之后又要做实时荧光定量PCR? 实时荧光定量PCR 的引物能不能用来做RT 实时定量PCR试剂盒选那种好?还有、rna提取的试剂盒,反转录试剂盒……做鱼的 PCR技术的新发展除了反转录PCR,荧光定量实时PCR,巢式/半巢式PCR,锚定PCR,单链构象多态性PCR外,还有哪些请问目前的一步法荧光定量反转录PCR试剂盒请问质粒的测序目的是什么?要做实时定量PCR和这一步有关联吗?