做western bloting 如何确定蛋白样品的体积

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：数学作业时间：2024/05/01 11:43:19

做WB关键不是确定样品体积,而是确定样品的蛋白量吧.
如果每个样品浓度不同,则需要统一一个上样量,体积上就会发生变化.所以最先需要先测定样品中的蛋白浓度,根据之前的经验先确定需要的总上样量,例如是15ug还是25ug蛋白,然后计算每个样品需要多少ul才能达到同样的蛋白量.
为了保证泳道间均一度,可以补水,让所有的样品都在同样的体积,再加loading实验.
当然,最后还需要根据WB的结果判断,用这些上样量不足还是过多.

western blot蛋白样品用什么稀释至一样的浓度,还有就是蛋白maker如何稀释至一样的体积? 做western,彩色的marker跑的胶上了,考马斯亮蓝没染出样品的蛋白条带.是样品的问题还是胶有问题? 准备要小孩能不能做分子生物学实验,比如western-bloting,PCR,养细胞等请问做Western blot非要测样品的浓度吗一般用什么方法测蛋白加样缓冲液的作用是什么做蛋白电泳时,在不知道蛋白样品分子量的情况下如何选择分离胶的浓度 western blot 如何体外获得目的蛋白求做western blot时提取贴壁细胞总蛋白详细的protocol 用western blot做磷酸化蛋白的测定需要注意哪些问题蛋白质的提取中如何确定目的蛋白? western blot 一抗孵育,为什么不可以将一抗和分析的蛋白样品一起先孵育,后page 电泳,这样更节约一抗? 做western blot时为什么转膜后膜上没有蛋白? 做western blot时,蛋白降解后转膜以后是什么样