假设已知一细胞群体中,含有表面抗原cd21+的细胞,如何将cd21+细胞分选出来?

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：综合作业时间：2024/05/22 12:56:00

假设已知一细胞群体中,含有表面抗原cd21+的细胞,如何将cd21+细胞分选出来?
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可以用抗体标记的方法通过流式细胞仪分选,如果没有流式细胞仪,可以用CD21的磁珠分离.
再问：谢谢，能提供一下详细点的操作吗，感激不尽！
再答：好的。如果是流式分选的话可以用以下步骤： 1.准备单细胞悬液：淋巴组织、骨髓、血液或培养的细胞。 2.用冰染色缓冲液洗细胞2次，离心细胞，用冰染色缓冲液重悬细胞，使终浓度为2×107细胞/ml。 3.各取50ul（106细胞）细胞悬液到2个圆底的Ep管中。 4.根据抗体说明书在其中1个Ep管中加入合适的抗体量，另外1个加入同型对照抗体，冰上避光孵育 20分钟（建议每5分钟轻轻混匀，以免细胞沉积）。根据荧光抗体的亲和力适当延长染色时间。 5.用1ml染色缓冲液洗2次去除未结合的抗体，300×g离心5分钟，每次离心后小心吸取上清。 6.用适量染色缓冲液（如500ul）重悬细胞。 7.流式细胞仪分析染色结果（不超过4小时）。如果暂时无法检测，也可以将染色后的细胞用4%多聚甲醛固定后，避光储存在4度。固定后的细胞可以保存最多一个星期。如果是用磁珠分选，你需要查一下有没有针对CD21的。步骤按照说明书即可。

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