[求助]跑DGGE电泳时老中断,怎么回事?
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/21 07:16:57
如果你开了挂或者是别人带你时,带你的那个人开挂,这样你都可能出现连接中断,中断之后要过一个小时左右再登差不多就好了,如果是你自己开的挂有可能被封的啊.
聚合酶链式反应和变性梯度凝胶电泳相结合的方法,通常用来分析样品中微生物菌落构成的多样性!
SYBRGREEN1
PCR-DGGE主要是扩增微生物的核糖体小亚基基因的可变区,如细菌的16SrDNA的V3区,通过变性梯度凝胶电泳可以将不同序列的DNA片段分离开来,不同位置的条带代表不同的微生物,条带切胶回收测序还可
天天客盈门,海鲜味道纯.迎来又送往,不忘老客人.
这个还可以啊,有的有条带,有的是没有,都弥散了.
里面的玻璃板没夹好,漏水了,玻璃板间的正极液和槽中的负极液相通,电流不从胶上过了,就这样了,漏水的位置在中央跑的慢的地方照片反光,看不清,我估计你玻璃板间的水位肯定不满了这种情况,早点发现的话,拆了重
跑SDS-PAGE时只要你进行染色之后加热都会变性的,使蛋白质中的亚基分开了
这个一般要根据你的蛋白浓度而定.蛋白浓度1mg/mL时,一般上样20uL.
actin如果都扩不出来那不是反转有问题就是RNA已经降解了.建议检查这两步的样品.建议检查程序,重新反转,如果还是扩不出来的话,重新抽RNA,再不行,回家过年吧.
你是想问单片机课程中讲中断时的原理图上的开关吗?那些只是一些示意图,不代表具体电路,只考虑逻辑关系,比如说要用定时器0中断,则ET0这个开关需要闭合(ET0=1),EA这个开关也要闭合(EA=1)
我们跑电泳不是先加EB的,跑玩再染.现在换了替代品了,安全点.你的情况会不会是EB分解了
RNA在提取过程中和保存期间非常容易被RNA酶降解,提取过程得非常小心,保存期间也得加RNA酶抑制剂,不知道紫外分光光度计检测时含量和纯度如何,及时被降解,也应该有拖尾才对,可能是浓度太低,建议加大上
化学书上电泳的概念:在溶液中,带电粒子在外加电场的作用下,向相反电极方向移动的现象就叫电泳.所以电泳其实也就是在分子、原子层次上做的操作,就跟常说的纳米那个概念一样.汽车涂装就是要加防腐蚀之类的保护膜
后加电泳液的话液体溢过胶体时的流动容易把蛋白质样本冲出其所在的井.而且这样做容易在胶体四周留下液体无法进入的空隙,可能影响电泳效果.应该是这样
一般不用带GC的,这主要是因为高GC序列的测序结果会受到比较大得影响,如果测出来的峰都不错,可以去除前面一段GC夹子后还是一样用的
你割胶后直接克隆了,还是又做了一遍PCR再跑普通的胶?建议用后一种方法再试试.割下条带后,提纯.以此为模板再做一次PCR.再克隆.
对颜色较深的条带进行切胶,切胶之后加入TE溶液,4度过夜后进行PCR(用带GC夹子的),再进行DGGE电泳以确定是单一条带;确认之后再用不带GC夹子的引物进行PCR,之后克隆、测序、系统发育分析即可.
将PCR扩增片度用BIO-RAD的D-Code的通用突变检测系统进行电泳.
能的.因为DGGE是部分变性,所以切胶回收后经过复性即可.根据你的酶切位点连接到载体上就可以送去测序了.不过有点奇怪为什么你想测序呢?