pcr的ct值太高什么原因

看看你的GAPDH引物Tm多少,有可能是因为PCR条件适合目的基因引物对而不适合内参引物对吗?再问：不知道，我是个新手什么都不懂再答：那么童鞋，你还是找一个师兄师姐前辈高人带一下。网上这样问很难问出来

这个要看你在做PCR前的加样量是否一致.如果加样量是一致的,而内参做出来差别大（比如3-4个CT值）那说明你的实验体系有严重的问题.理论上加入的DNA量一样多,内参的CT值应该都一样.如果你能肯定加样

阈值和基线的设置肯定会影响Ct值,你可以采用每次反应完后软件自己选定的阈值.你也可以手动调整,但是如果你是相同的模板,做不同反应,那你必须使两次实验的阈值和基线调到相同.使用相同的标准品,才能减小不同

你好,这个要在开始的时候选择“相对定量”模式,软件才会给出扩增效率

就是cyclethresholdvalue的standarddeviation(STD.DEV).你做realtime的时候同样的样品肯定有replicate或者triplicate的.这个指标就是检

通常情况下,我们认定为15到35CT比较合理,超过35个CT那么就算它没有扩增了,如果15之前起峰,那么就是模板浓度太高所引起的,如果发文章,那么建议你控制在15到35之间吧

仪器配套软件会直接给出来一个CT值,也可自己调节

http://www.bio168.com/mag/402A1123371/5A1AB126109.html东胜创新的一个实例.

请问你做RealTimePCR做几个循环的?40个吗?40个循环的话,CT值在30左右很正常的啊,CT值30的话大概是10000copies,说明模板含量低嘛,定量定量就是要CT值有大有小的才有比较嘛

1、操作者不熟练,加样时存在取样误差2、PCR仪器不稳定,如温度,湿度影响3、试剂不稳定,如你的DNA模板降解,Taq酶活性下降等

不知道你说的是PCR循环中的延伸还是循环结束后的终延伸.循环中的延伸步骤实际上是让taq聚合酶开始合成DNA,taq聚合酶是高温活性酶,在72度的时候合成DNA.如果是循环结束后的5～10分钟终延伸,

你一次实验做的数据,内参可以得到几个CT值,目的基因也会得到几个.这样的话,根据平均的CT值,就会得到一个倍数（相对量）.实验肯定不会只做一次吧,至少重复3次以上.这样就会得到3个以上的倍数了.3个以

△△Ct=△Ct(试验样品)—△Ct(基准样品)△Ct(试验样品)=Ct（试验样品,目的基因）—Ct（试验样品,内参基因）△Ct(基准样品)=Ct（基准样品,目的基因）—Ct（基准样品,内参基因）2－

看了你空间里的溶解曲线,你可以看到溶解峰的温度都很低,全在80以下,你扩出来的东西多半只是引物,你跑定量的时候有做NTC的孔吗,如果有做,可以对照NTC组和加了模板的组,溶解峰还是一样的话,那你扩出来

我的模板质粒非常异常,超螺旋的部分亮度太亮了.引物有一个也是用了好久的.我最近做拼接PCR也是弥散带,把所有的东西都换了一遍,锁定引物和模版.我的模板质粒非常异常,超螺旋的部分亮度太亮了.引物有一个也

表示PCR可以扩增出一段特定的序列.

第一,螺旋CT和增强CT完全不是一回事.所谓螺旋CT,是指扫描的时候使用螺旋技术,而所谓增强CT,就是再扫描的同时或者扫描前半分钟左右从静脉里高压注射造影剂,用来观察病变部位的血供情况,来进一步判断病

您好十字绣布有好几种规格有11C14CT9CT,它们之间的区别在于绣布上洞洞密度的不同所用绣线的粗细就不同,正常比较好的品牌来说（KS、DMC、皇室蒙娜丽莎,等等）14CT的布绣2股线,11CT的布绣

△Ct（n）=Ct目的基因（n）-Ct内参基因（n）；△△CT（n）=△Ct（n）-△Ct（1）；然后算出2-△△CT；标准差我是同一处理做了3个平行算出来的.没法下标,用括号处理,

1退火温度不合适2引物不合适3模板有问题4酶由问题