咪唑钠bca蛋白浓度测定仪
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/15 16:03:28
余氯和二氧化氯不是同一个概念,因此检测二氧化氯需要用专门检测二氧化氯的分析仪,快速检测、在线二氧化氯分析仪.
血浆蛋白在血浆固体成分中含量最多,大部分由肝细胞生物合成,通过盐析方法可分为白蛋白和球蛋白两大类,具有维持胶体渗透压、运输、调节、缓冲、营养、催化、免疫等重要的生理功能.血清总蛋白增高见于血液中水分减
Ni柱中的氯化镍可以与有HIs(组蛋白)标签的蛋白结合,也可以与咪唑结合.步骤是:过柱子前可以选择Ni柱重生,也就是往柱子里倒氯化镍,一个柱长体积就行了,然后平衡柱子,拿你自己的buffer,给蛋白提
你用标准的已知浓度的BSA溶液配几管不同浓度的,然后在分光光度计上测出来,把读数跟已知的浓度做一个曲线(有可能是直线),这就是你的标准曲线然后再测你的目标样品的浓度,用读数在标准曲线上找到对应的真实浓
BCA实际盒我用过,确实比考马斯亮蓝试剂要灵敏多了.操作也很简便原理简介BCA(bicinchoninicacid)法蛋白浓度定量试剂盒是在世界上常用的蛋白浓度检测方法之一BCA法基础上改进而成.众所
westernblot检测是用特定抗体检测特定蛋白,BCA法是检测蛋白浓度,即使BCA法检测蛋白浓度高,但也不一定有你检测的蛋白啊?还有你要保证你westernblot操作没问题哦,最好做个内参.
可以用凝胶成相软件.我们用的是quantityone.你也可以用你自己的文件转存成tif格式的图片,这样这个软件才可以识别.你可以从网上下到这个软件的4.62版本和破解补丁
必须的,非离子表面活性剂会干扰BCA的测定结果.具体的原因应该是非离子表面活性剂的存在会影响Cu和蛋白质的结合.不过皮尔斯的MicroBCA据说不受非离子表面活性剂影响.不过你的膜蛋白没有去污剂好溶解
Bradfordassay的线形关系有一定限制,在2µg/ml到120µg/ml之间才存在线形关系.你首先要确定你的稀释倍数是不是符合标准.另外,就是蛋白质本身的氨基酸构成了.
试剂A:1%BCA二钠盐,2%无水碳酸钠,0.16%酒石酸钠,0.4%氢氧化钠,0.95%碳酸氢钠.混合调PH值至11.25.试剂B:4%硫酸铜.蛋白质标准液:用结晶牛血清白蛋白根据其纯度用生理盐水配
一般做包涵体复性,所用的变性剂是8M尿素和6M盐酸胍,是两个一起用的.只用一个有时候效果确实不怎么好.而且啊,在变性剂中,也是有部分蛋白不会溶的,所以多少都会有沉淀的.做包涵体复性很麻烦,我建议你试试
可能是催化剂加的太少了,或者酸加多了再问:催化剂是6.4g,浓硫酸12ml。再答:你用的是凯氏定氮仪吗?我用的时候,酸是加10毫升的。再问:是凯氏定氮仪。再答:你可以看看你消化2.5小时后是否变成蓝色
1.把标准品的浓度和对应吸光值输入到excel里面,如果酶标仪直接有导出功能的话,直接导出到excel里面就行.2.选中浓度和吸光值,插入散点图3.选择任意一个点,点右键,选择添加趋势线4.在分析类型
标准品就是纯的那个蛋白用来做一个不同浓度梯度下的标准品曲线这样你测出来的吸光度再对照标准品曲线去换算浓度是多少
lysisbuffer中加咪唑的目的是与杂蛋白竞争,使那些与填料亲和力弱的杂蛋白不能挂柱;washbuffer中加咪唑是为了洗去大部分已挂柱的杂蛋白(也会洗去少量目的蛋白);elutionbuffer
1,破细胞,高速离心收上清收集上清(同时平衡好柱子);2,既然你是His-tag,用Ni-NTA之类的柱子,两次上柱,buffer平衡;3,低浓度咪唑(5mM)洗5-10柱体积,以洗去杂蛋白;4,过梯
草酸钠溶液具有还原性,可以使高锰酸钾溶液褪色已经标定浓度的草酸钠溶液去滴定已知体积未知浓度的高锰酸钾溶液不需指示剂,高锰酸钾溶液褪色时,就可以得到消耗草酸钠溶液体积根据5C2O4(2-)对应2MnO4
需要用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,一般是加入SDS,有多条肽链的蛋白质由于变性彼此分离,又因为不同的分子量在凝胶的迁移速度不同,因此形成不同的条带.
既然是已知蛋白,当然是紫外比色测定最为简便可以标准品对照,也可以双波长比色法测定
题目不太清楚.你的样品是什么?会不会不纯含有其他蛋白.染色方法对不对?如果所需验证的蛋白含量很少,银染分辨率比考然高.会不会跑胶跑过头了?