作业帮割胶时割到目的条带下边的条带
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/24 15:55:00
我也遇到过这种问题,个人觉得可能是目的基因的定量引物不好,还有就是要优化PCR条件!
建议：循环次数减少3,Mg离子浓度降低到1.2mm,提高annealing的温度
如果实验目的只是基因型鉴定,对PCR产物无其他要求的话,二聚体并非不能忍受,可以尝试以下方法优化反应条件：1.确定DNA模板为阳性,即确定含有目标序列；2.对退火温度设置温度梯度,琼脂糖电泳检测是否有
当然不一定,比如说你的目的基因的copynumber高或者PCR的效率高都会使得beta-actin的条带不如目的基因的条带亮
存在两种可能性,第一,引物设计错误,可以将引物和参考序列进行拼接后看看能不能顺利拼接,以及拼接之后的目的片段长度；第二,可能是非特异扩增,这个时侯如果确定引物位置没有问题,可以调整退火温度,以及PCR
你的对照组是什么?对照组有没有出现问题?有问题的话是很可能是你在操作过程中有问题膜的质量是否有问题?再问：对照组没问题。膜是pvdf，质量有么问题？操作怎么不当了？会导致什么？请帮忙分析一下，合理再加
爱心、真心、无心、慈心、孝心、良心、诚心、佛心、热心、开心、苦心、知心、甜心、伤心、痴心、醉心、狠心、变心、祸心、小心、倾心、死心、恶心、尽心、倾心、谈心、专心、违心、忠心、衷心、决心、唯心、实心、空
如果PCR系统没有问题,很可能是质粒和染色体发生了重组.建议提细菌的genomeDNA做一次PCR.如果是阳性,就说明是这样.另外,还可以另挑几个菌落,重新提质粒扩增.
可以照胶的时候去调节亮度,对比和γ射线,然后会清楚一些.同时,你优化下PCR扩增条件之类的,提高扩增效率.希望对你有帮助.望采纳.再问：感谢回答，我会试试调节亮度。请问，这跟电泳时使用的染色液有关系吗
假阳性1.平板是否加抗性?2.引物设计是否有问题?3.载体自连现象是不是很严重?建议做个对照4.菌落pcr条件是否合适?
就只是你的目的基因菌液PCR扩增不出来么?不过我觉得你如果质粒、电泳、菌落PCR都能验证的话,菌液PCR结果如何都意义不大了.
一个可能原因,DNA结合了蛋白质,所以跑不出去.加loadingbuffer后加热（90度以上）一下再上样试试.另外一个原因,你的产物特别大（不一定是目标产物）再问：我做的是菌落PCR电泳检测结果，我
1、内参没有被扩增出来2、电泳时内参没加loadingbuffer或染料
恐怕还是cDNA的问题,actin因为量比较丰富,所以即使破坏一些仍能P出来,但你的目的基因就不同了
发个照片看看.
有很多影响因素：模板浓度,引物浓度,酶在反应过程中的不断消耗,循环数和温度等等.如果你已经P出来目的片段的话温度应该是适合的,可以加大模板和引物的量,建议回收片段后作为模板再P,这样得到的片段会较亮.
酶切位点消失啦,测个序看看.再问：测序了，说我的链接质粒没有信号再答：重新做吧，多半不对！
可能是菌的基因组DNA,不过基因组DNA是很大的,不只2k还有可能呢,是引物特异性不好,从转入质粒上克隆出了你的目的片段,但从菌基因组或者质粒序列上扩出来一个非特异
PCR条带不够亮,说明扩增效率不高.一方面可能是你的引物设计的不够好,导致扩增效率低；二是引物的退火温度,你可以做个温度梯度PCR摸索下最佳退火温度,这样可以提高引物扩增效率.三是,DNA模板,浓度过
001、滁州西涧韦应物独怜幽草涧边生,上有黄鹂深树鸣.春潮带雨晚来急,野渡无人舟自横.002、永崇里观居白居易季夏中气侯,烦暑自此收.萧飒风雨天,蝉声暮啾啾.永崇里巷静,华阳观院幽.轩车不到处,满地槐