上下游引物是单链还是双链

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/06/05 20:34:18
pcr 为什么要同时用上下游引物

你理解的没错.上下游引物同时用才能特异性扩增中间的那部分片段.

PCR扩增一下序列,请写出上游引物和下游引物.

上游:5ggaattcatgtttagtttgaaaaaaac3下游:5gggttcgaattagacattgccaacatatt3你要的并不是鉴定引物,而是扩增引物根本不用软件

如果让你来设计一段已知dna序列的上下游引物,应该注意哪些方面

引物设计原则:1、长度:15—30bp,其有效长度[Ln=2(G十C)十(A十T)]一般不大于38,否则PCR的最适延伸温度会超过Taq酶的最佳作用温度(74度),从而降低产物的特异性.2、G十c含量

谁能通俗易懂的给我解释一下PCR反应过程中,引物与模板如何结合?扩增出来的是上下游引物之间的片段呢?

为了形象,不写ATCG,换个比较容易看懂的形式模板是:abcd123.456efgh上游引物是:987ABCD123下游引物是:456EFGH789(这里为了方便观察下游印务给出了3’-5‘形式,通常

pcr时如何进行上下游的引物设计?

个人推荐使用PrimerPremier5

想用PCR扩增下面一段序列,急求高手写出上游引物和下游引物.

上游引物:GAATTCacgcgcaagattagg(后面可以继续加几个碱基,用PRIMER5.0看一下,引物设计多少个碱基合适,每个基因序列不同.我用TOYOBO的KODPLUS的话,就一般引物设计

PCR时加入的引物是DNA是单链还是双链的?

通俗的讲,引物就是为了增幅目的DNA而导入的短小DNA片断,在PCR反应中,新合成的DNA是要接在引物上才能继续按照模版DNA复制.引物的设计因需要增幅的序列而不同是单链

反转录PCR引物如何设计?已经得到cDNA第一链,引物设计是以cdna为模版,设计上下游引物吗?

不,需要两条,因为随着你PCR的进行,另一条互补链会被引物扩增出来,因此你需要两条引物都加进去.再问:那么我引物设计的时候,是不是以mRNA为模版与以CDNA为模版设计的引物都可以?再答:都可以,别忘

mRNA反转录是特异性引物加上游还是下游的

NCBI上面得到的是mRNA序列可以用oligodt反转录,也可以用与mRNA互补的特异引物来反转录再问:恩,特异性引物有一对,上游和下游,老师问我用上游还是下游,望回答具体点再答:反转录当然是下游了

追问引物设计第一次PCR的产物胶回收后用纯化吗,还是可以直接当做底物?目的基因3‘端GC含量太高,导致上下游引物Tm值差

第一次PCR产物不要做任何处理,直接吸取1微升做第二轮PCR的模板.第二轮PCR过后再跑胶回收你的目的条带.外引物不在你的目的基因上,而在你的目的基因两侧.所以你设计外引物时是从一个很宽泛的范围内寻找

上下游引物退火温度分别为47、49℃,如何设置温度梯度PCR最合适

博凌科为-为你上下游温度很接近啊,45度,上下5度,0.2每个梯度.或者直接用47度P

为什么PCR需要上下游两个引物,各有什么作用啊?

PCR反应第一步DNA双链变性逐步打开,第二部退火时两个引物各自与其互补链的5‘端通过碱基互补结合,并在第三步延伸反应时在引物的3’端不断加上新的碱基从而不断向前延长.每个引物的作用都一样.用上上下游

【求助】测序结果找不到上下游引物,怎么回事啊?

[color=red][/color]4.28送菌液去某公司测序,昨天收到的测序报告连上下油的引物都找不到.后来我又做了菌落PCR(设阳性,阴性对照)有目的条带.请问各位是什么原因啊?测序结果上不会有

做PCR酶切,提供给商家的引物序列是文献上写的上下游引物吗(我用的是文献里的序列)?

引物有一条和模版的序列相同,而另一条和模版的序列反向互补,上游和下游是自己定的,分别位于模版的两端

弱弱的问个问题,现在有三十二对引物,浓度为100μM,做10μl的PCR反应体系,上下游引物各需5pmol,我该怎怎么稀

以下基于我认为开始的100μM是每一个引物的浓度.你把每条引物稀释10倍到10μM,然后把上下游引物1:1混合在一起,这样上下游引物最终为5μM.PCR的时候10μl的体系里面加入1μl之前混合好的引

为什么PCR引物设计中引物可以不从扩增序列两头开始?不从两头开始能得到上下游引物以外的序列吗?

这个问题很简单,扩增序列应该称为目的基因,目的基因一般都上万bp,从两头开始当然不合适.PCR扩增只能扩增出上下游引物之间的序列,因为只有引物之间的DNA双链是解链状态的.你的问题说明你对基础知识掌握

设计引物的时候上下游引物的退火温度分别是56.9和56摄氏度,PCR时退火温度应选多少度!

一般认为Tm-5度.但是要看你的Tm计算方法,不同公司合成的引物得出的Tm都不一样,你可以做个梯度PCR看看最适退火温度,以后就有经验了.

已知下游引物序列,怎么去基因DNA上找到这个序列?如给定3-GTGTATGTGGCAATGCGTTC

运用DNASTAR软件把DNA序列反向互补,然后再用引物去匹配就可以了