我做的实验是提取总的RNA,然后反转录,再PCR,最后出来的结果是这样的见图,我的目的条带为500bp

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：生物作业时间：2024/05/18 06:23:53

我做的实验是提取总的RNA,然后反转录,再PCR,最后出来的结果是这样的见图,我的目的条带为500bp
我的条带为一片，没有特意性的

这就是特异性不好,建议做如下改进：
1,控制好RNA提取过程,尽量减少RNA降解和基因组DNA的混入；
2,严重怀疑你的模板量过高,把模板稀释10-1000倍的梯度试试；
3,做二阶段温度pcr,先用稍高退火温度p上5循环,剩余的再用你现在的温度,或者有梯度pcr仪的话,做梯度pcr；
4,如果镁离子浓度较高,可稍降镁离子浓度.
欢迎继续讨论,纯属手打,祝实验顺利!

我做的实验是提取总的RNA,然后反转录,再PCR,最后出来的结果是这样的见图,我的目的条带为500bp 请问,我反转录时设置了2个循环,cdna还可以做半定量PCR吗?Actin的pcr在500bp单一条带. RNA的提取和反转录的实验步骤? 实时定量PCR试剂盒选那种好?还有、rna提取的试剂盒,反转录试剂盒……做鱼的为什么我的RT-PCR内参跑不出来.目的条带到是跑出来了反转录PCR的目的我是做转基因的转出来后老板让我做反转录PCR做那个干啥啊?我想问下对我试验有什么意义呢？ RT-PCR：每天只能提取几份血样本的total RNA,请问我是应该提取完之后直接-80保存还是先反转录再保存? 做逆转录PCR,扩增出的条带怎样区分是残留基因组DNA还是反转录得到的cDNA得到的结果 PCR目的条带的问题, 提取IBDV基因组RNA,然后RT-PCR,结果跑出条带700bp左右,原因是什么啊!目的条带应该是3000bp左右. 单克隆验证,菌液PCR有目的条带的位置,但是质粒PCR后,却没有批出我的目的条带这是为什么呀 RT-PCR做不出来我是一个新手,我现在在做反转录,在PCR,可是我扩了好几次,就是做不出什么,我排除了试剂的问题,就是