作业帮用什么办法可以提取DNA?
来源：学生作业帮 编辑：作业帮 分类：生物作业 时间：2024/05/12 07:51:06
用什么办法可以提取DNA?
就是可以看到发光的DNA的相当大的分子,我以前在电视上看到过,可现在忘记了~~
我还记得要用蛋白酶来溶解杂质的。
就是可以看到发光的DNA的相当大的分子,我以前在电视上看到过,可现在忘记了~~
我还记得要用蛋白酶来溶解杂质的。
发光是因为用了发光物质标记的.
利用液氮对组织进行研磨,从而破碎细胞.细胞提取液中含有的SDS 溶解膜蛋白而破坏细胞膜,使蛋白质变性而沉淀下来.EDTA 抑制DNA 酶的活性.再用酚、氯仿抽提的方法去除蛋白,得到的DNA 溶液经乙醇沉淀.
取4g 新鲜叶片,在液氮中研磨成粉末状（越细越好）.
2． 转移至50 mL 离心管中,加人16 mL 细胞提取液,充分混匀.65
℃水浴保温20 min .
3． 从水浴中取出离心管,加人5 mL 5 mol/L KCl 溶液,混匀,冰浴20
min .
4.4 000 r/min 离心20 min .
5.将上清液转移到另一50 mL 离心管中.
6． 加等体积酚／氯仿混匀,12 OO0 r／min 离心5 min ,取上清.
7． 加等体积氯仿,混匀,12 000r / min ,离心5 min ,取上清.
8． 加人0.6 - 1 倍体积的异丙醇（沉淀DNA ) ,混匀.
9． 离心获得沉淀,70 ％乙醇洗3 次.风干沉淀.
10． 加人500 μL TE 缓冲液,溶解DNA .
11． 取3μL 上清液,琼脂糖凝胶电泳检测DNA 浓度、质量.
最后用EB跑电泳就可以看到你在电视上看到的发光的dna了
利用液氮对组织进行研磨,从而破碎细胞.细胞提取液中含有的SDS 溶解膜蛋白而破坏细胞膜,使蛋白质变性而沉淀下来.EDTA 抑制DNA 酶的活性.再用酚、氯仿抽提的方法去除蛋白,得到的DNA 溶液经乙醇沉淀.
取4g 新鲜叶片,在液氮中研磨成粉末状（越细越好）.
2． 转移至50 mL 离心管中,加人16 mL 细胞提取液,充分混匀.65
℃水浴保温20 min .
3． 从水浴中取出离心管,加人5 mL 5 mol/L KCl 溶液,混匀,冰浴20
min .
4.4 000 r/min 离心20 min .
5.将上清液转移到另一50 mL 离心管中.
6． 加等体积酚／氯仿混匀,12 OO0 r／min 离心5 min ,取上清.
7． 加等体积氯仿,混匀,12 000r / min ,离心5 min ,取上清.
8． 加人0.6 - 1 倍体积的异丙醇（沉淀DNA ) ,混匀.
9． 离心获得沉淀,70 ％乙醇洗3 次.风干沉淀.
10． 加人500 μL TE 缓冲液,溶解DNA .
11． 取3μL 上清液,琼脂糖凝胶电泳检测DNA 浓度、质量.
最后用EB跑电泳就可以看到你在电视上看到的发光的dna了