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DNA提取需要注意什么?

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/16 15:02:39
DNA提取需要注意什么?
这个自己叙述不太好说,我做过基因工程的实验.看了看这个,觉得还行,就给你复制下来了
1.固定剂对DNA的影响固定剂的类型直接影响提取DNA的质量.
2.固定时间对DNA的影响固定过程中所发生的组织反应至今尚未被完全理解,虽然理论上讲室温下福尔马林与DNA几乎不发生的,但已发现碱基与组蛋白之间的甲基交联.这福尔马林介导的甲基化直接影响DNA提取的效率.
3.固定温度等其他因素对DNA的影响核酸与固定剂的反应由反应成分、浓度、酸碱度以及温度等因素的调节,其中温度效应显得特别重要.
4.组织处理过程对DNA的影响我们发现,从常规组织处理的蜡块中提取的DNA,其大部分分子量晨100bp-10000bp之间,主要分布于100-1500bp,仅约1/3的组织所提取DNA>20kb.这除与固定剂、固定时间等因素有关以外,可能的原因还有:①组织从外科切除到固定之间的时间长短下一.当组织未固定或固定不充分时,核酸酶可自由作用;②不同肿瘤中核酸酶的水平不一,其在固定前或固定后均不发挥作用;③蜡块贮存的地间长短不一.虽然本所获得的DNA分子量大.可能蜡块中仍存在导致DNA降解的因素.组织的浸蜡和包埋温度过高或时间过长,均可导致DNA弯性,而产生单链DNA片段.单链DNA不能被限制性内切酶所消化,可导致电泳时泳动速率变慢