博凌科为多糖多酚植物总RNA快速提取试剂盒（离心柱型）试剂盒组成及提取原理,特点如何

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：综合作业时间：2024/05/15 18:57:10

博凌科为多糖多酚植物总RNA快速提取试剂盒（离心柱型）
改进的异硫氰酸胍/酚一步法裂解细胞和灭活RNA 酶,然后总RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤,去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除,最后低盐的RNase free water将纯净RNA从硅基质膜上洗脱.
植物组织RNA提取的难点
1、酚类化合物的干扰
许多植物组织特别是植物的果实和树木类植物中富含酚类化合物.酚类物质的含量会随着植物的生长而增加.因而从幼嫩的植物材料中更容易提取RNA.此外,针叶类植物的针叶中多酚的含量比在落叶植物的叶子中要高得多.在植物材料匀浆时,酚类物质会释放出来,氧化后使匀浆液变为褐色,并随氧化程度的增加而加深,这一现象被称为褐化效应(brownins effect).被氧化的酚类化合物(如醌类)能与RNA稳定地结合,从而影影响RNA的分离纯化.
2、多糖的干扰
多糖的污染是提取植物RNA时常遇到的另一个棘手的问题．,植物组织中往往富含多糖,而多糖的许多理化性质与RNA很相似,因此很难将它们分开.在去除多糖的同时RNA也被裹携走了,造成RNA产量的减少：而在沉淀RNA
时,也产生多糖的凝胶状沉淀,这种含有多糖的RNA沉淀难溶于水,或溶解后产生粘稠状的溶液.由于多糖可以抑制许多酶的活性,因此污染了多糖的RNA样品无法用于进一步的分子生物学研究.
3、蛋白杂质的影响
蛋白质是污染RNA样品的又一个重要因素.由干RNase和多酚氧化酶亦属于蛋白质,因而要获得完整的、高质量的RNA就必须有效地去除蛋白杂质.
4、次级代谢产物的影响
从植物组织中提取高质量RNA的另一个难点是许多高等植物组织尤其是成熟组织能产生某些水溶性的次级代谢产物,这些次级代谢产物很容易与RNA结合并与RNA共同被抽提出来而阻碍具有生物活性的RNA的分离.
试剂盒特点:
◆ 快速去除多糖,上样孔无多糖污染：
◆ 独特多酚沉淀剂,防多酚氧化同时沉淀多酚：
◆ 独创漂洗液RD,特异性洗掉基因组,确保得到的RNA无基因组污染：
◆ 成功提取进口TRIzol及Q公司试剂盒无法很好提取的多种植物RNA,包括仙人掌、仙人球、芦荟、凤梨、水仙、黄瓜、辣椒、胡萝卜、玉米、大豆、百合、小麦、西红柿、花菜、油菜籽等；
提取范围:
仙人掌、仙人球、水仙、黄瓜、胡萝卜、辣椒、西红柿、烟草、玉米、大豆、百合、小麦、拟南芥和其他大多数植物.
产量:
每100mg组织10～50μg不等