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用Trizol法提DNA遇到的问题求教

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/27 02:32:18
用Trizol法提DNA遇到的问题求教
Trizol是用来提取RNA的,因为pH低,所以DNA都是溶解在酚相的,你可以用pH8.0的Tris平衡酚来提取DNA
再问: 你好,首先非常感谢你的回答,我的一般步骤是这样的,加完trizol之后,氯仿离心后,弃水样,然后加无水乙醇,再离心,弃上清,再用柠檬酸盐洗两遍,然后用75%的乙醇洗一遍,晾干,但是我现在浓度很低,只有几十ng/ul而且260/280也不太好,纯度不太高,所以我想问下你的方法能具体说下吗?
再答: 跟你的差不多,样品放在Tris平衡酚中,加氯仿,离心,弃酚相,把上清水相吸到新的管子中,DNA在水相中,蛋白什么的在酚水相之间的分界中,乙醇沉淀的时候加入一些醋酸钠助沉,沉淀直接用75%的乙醇洗一遍,晾干,溶解
再问: 先谢谢哈,我还想问下那你有测过它们的浓度和纯度么?产量如何呢?乙醇沉淀时能看到像提RNA时的一些白色沉淀么?还有你有将这个溶液做成粉末的经验么?因为得送出去,液体的不太好保存呢。。。
再答: 产量和浓度测过,看你提什么东西的DNA了,如果你有条件,可以买个kit用,非要手抽的话,你直接用冻干仪冻干就行了