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下列哪一种方法不能用于检测目的基因是否成功导入或表达?

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/16 23:08:36
下列哪一种方法不能用于检测目的基因是否成功导入或表达?
A.将目的基因直接进行放射性标记,导入受体细胞后用检测仪跟踪.
B.在含某种抗生素的培养基中培养导入了重组质粒的大肠杆菌.
C.利用相应的DNA探针与受体细胞DNA分子进行杂交.
D.提取受体细胞蛋白质,利用抗原-抗体特异性反应进行检测.
选A
A,这种方法是不行的,因为受体细胞多次分裂以后,子代细胞就会失去放射性(因为只有最初的DNA模板具有放射性,而DNA合成的原料不具有放射性),所以就无法判断了.
B,可以.只有成功导入和表达的,可以产生对抗生素的抗性,可以在此培养基上生存和形成菌落;否则,不能生存和形成菌落.
C,可以.如果有杂交区域出现,说明导入成功.
D,可以.如果产生抗原抗体反应,说明导入和表达成功.
再问: 那A中如果在染色体上检测到放射性,那不是就说明导入了么? B中又没说重组质粒上有抗性基因,好象不准确吧?
再答: 染色体?一般,导入的目的基因都是不会整合到宿主DNA上的。 注意:导入之后还要能够保持在子代细胞中稳定存在才可以,有些质粒虽然初次可以导入,但是可能不能在宿主细胞中稳定存在和大量复制,宿主细胞多次分裂之后就丢失了。即使可以稳定存在,而多次繁殖以后,子代细胞也无法跟踪检测,因为新合成的子代目的基因的DNA分子不具有放射性,也就无法跟踪判断了。注意选项中的【跟踪】二字的含义。 B选项,用于基因工程的质粒,必须是含有抗性标记的,这是实验“潜规则”,不用特别说明。