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做免疫共沉淀是电泳图怎么看?特异性条带怎么区别?

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/09 13:58:29
做免疫共沉淀是电泳图怎么看?特异性条带怎么区别?
如果已知目标蛋白是什么,只要做WB就可以看了
如果未知目标蛋白是什么,则需要根据与阴性对照的结果对比来判断.也就是没有加抗体,只有beads和蛋白孵育的对照组没有这个条带,而实验组有,才能说明是抗体特异捕获到的条带,而不是beads上黏住的蛋白.
再问: 恩谢谢明白了!那孵育是怎么进行的呢?
再答: 阴性对照除了不挂抗体,其他需要和样品组完全一样的操作,包括上样量,孵育条件和洗涤,洗脱条件,这样才能作为对照。 有些还要检测抗体特异性的,还得挂无关抗体做阴性对照。 你先做简单的吧。
再问: 那孵育条件是什么呢
再答: 你样品怎么孵育的啊?可以4C过夜,也可以室温2h。蛋白量少的就4C过夜吧。
再问: 哦知道了