作业帮一道生化试题欲求有本事之人赐教
来源：学生作业帮 编辑：作业帮 分类：生物作业 时间：2024/05/27 09:17:54
一道生化试题欲求有本事之人赐教
预分离一蛋白质混合液ABC,其中蛋白质A是一种胞外酶,B是不含芳香族的氨基酸,设计这三种物质 的分离方案?（注：C的等电点为5.8,MW为9.6万D,B的MW为15.3D,A可以催化以NAD正离子为辅助因子的氧化还原反应,MW为13.6万D）
预分离一蛋白质混合液ABC,其中蛋白质A是一种胞外酶,B是不含芳香族的氨基酸,设计这三种物质 的分离方案?（注：C的等电点为5.8,MW为9.6万D,B的MW为15.3D,A可以催化以NAD正离子为辅助因子的氧化还原反应,MW为13.6万D）
这种题不太好答,因为可能的路线很多.
看题意,b不能用紫外检测,层析要注意；a可以用亲和,也可以用NAD的特征吸收检测.等电点不知道有什么用.
可以非变性PAGE,再分别回收,不过比较麻烦,收率低,染色也麻烦.
可以先用分子筛,洗脱时收集,见到第一个峰出完就换管,这样a和b收到一起,c被分开了.然后过NAD亲和柱,b不吸附.最后再把a洗脱下来.
看题意,b不能用紫外检测,层析要注意；a可以用亲和,也可以用NAD的特征吸收检测.等电点不知道有什么用.
可以非变性PAGE,再分别回收,不过比较麻烦,收率低,染色也麻烦.
可以先用分子筛,洗脱时收集,见到第一个峰出完就换管,这样a和b收到一起,c被分开了.然后过NAD亲和柱,b不吸附.最后再把a洗脱下来.