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双脱氧链终止法的简单过程是什么?

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/23 18:59:31
双脱氧链终止法的简单过程是什么?
几乎完全抛开专业术语来讲,专业人士不要扔砖DNA是脱氧核糖核酸,这就像有一个东西他一边是螺母一边是螺钉,可以一个接一个连起来,然后把螺母视为Free-Switch 所说的-OH,双脱氧就是少一个螺母,如果连上这个就无法继续延伸了.借鉴Free-Switch说 将待测的核酸链分为四份,分别加入四种双脱氧核苷酸后,分别加入四种双脱氧核苷酸后,以加入ddGTP为例,在DNA聚合酶合成到需要G碱基的核苷酸时,普通dGTP和双脱氧的ddGTP都有一定概率被合成到核酸链上.那些合成上ddGTP的核酸链不再延伸,而合成上dGTP的会继续朝下反应.这样,加入ddGTP的这份溶液最后会生成所有以G结尾的长度不一的核酸链.将这四份核酸链溶液同时进行电泳检测,从条带的位置以及链越短在凝胶中迁移越远的原则,即可判断出这些核酸链相互间的长短关系,从而推算出序列信息.短的跑得快在前面,长的慢在后面,由于四中溶液分开,所以断在那里,那个位置就是这种核苷酸