PCR无法P出目的条带
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/29 02:48:17
PCR无法P出目的条带
最近在做PCR,提取的基因组为模板,基因组序列上从NCBI上找的,没有错.但是无论如何换引物和PCR条件,都会得到一条比目的片段大500bp左右的亮条带.(引物换了很多对儿,卡的应该没有问题)这会不会是因为用于提取基因组的菌种曾经被噬菌体感染,然后刚好在目的片段被插入了一段500bp的小片段呢?求助!
最近在做PCR,提取的基因组为模板,基因组序列上从NCBI上找的,没有错.但是无论如何换引物和PCR条件,都会得到一条比目的片段大500bp左右的亮条带.(引物换了很多对儿,卡的应该没有问题)这会不会是因为用于提取基因组的菌种曾经被噬菌体感染,然后刚好在目的片段被插入了一段500bp的小片段呢?求助!
菌落PCR的假阳性高很可能是因为你做PCR的循环数过大,我们实验室一般对于高拷贝数的质粒,循环数不会超过25个,一般用25个.假阳性出现的原因关键在于做连接的时候加了比较多的目的基因的酶切产物,在转化时,那些没有连接入载体的PCR产物,有的会沾在感受态细胞上,还有的虽然在溶液中,涂板时一起就一起涂在板上了,挑菌的时候可能会挑到,即使没挑到,但菌表面的基因片段也有可能被扩增,如果你的循环数太高,就会在PCR时呈现阳性结果.
再问: 模板不是连接载体和转化菌体,是提取的Wild Type菌染色体DNA,只是获取目的片段那步
再问: 模板不是连接载体和转化菌体,是提取的Wild Type菌染色体DNA,只是获取目的片段那步
[菌液PCR,测序,DNA提取,求助]菌液PCR的时候能P出目的条带,为什么测序却完全不正确?
革兰氏阳性菌PCR革兰氏阳性菌如何做菌落PCR?煮20 min后,还是不能P出目的条带.
PCR目的条带的问题,
您好!我需要从cDNA调取一段基因,引物已经设计好,在PCR过程中不知如何调整体系,P不出目的条带?
PCR时小鼠GAPDH扩出条带而目的基因却扩不出是什么原因?
PCR电泳目的条带很浅
PCR只有引物二聚体的条带,没有目的基因条带
PCR跑出的条带与目的条带不同怎么办
RT-PCR 一对引物出很多条带
pcr时p不出目的基因 怎么办 急
菌液pcr检测目的条带很明显但是有弱杂带是怎么回事
用菌斑跑PCR有目的条带,用菌液怎么就跑不出?