作业帮 > 综合 > 作业

gc含量高pcr应该怎么扩

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:综合作业 时间:2024/05/15 07:55:33
gc含量高pcr应该怎么扩
1、TakaRA有一种酶叫做TakaRa LA Taq酶是专门对高GC含量的,当扩增具有复杂的二级结构 (GC rich等) 的模板或具有重复序列的模板时,使用GC Buffer进行PCR扩增将非常有效.里面有两种GC buffer,如以人基因组DNA为模板,可很好地扩增c-jun proto oncogene 1,255 bp (GC含量65%) 的DNA片段 (使用GC Buffer I,II).请先使用Buffer I,当使用Buffer I 不能扩增时,再试用Buffer II.
2、TransStart FastPfu Fly DNA Polymerase 特点:(1)新型热启动;(2)快速扩增;(3)高保真性;(4)强扩增能力;(5)高灵敏度;(6)高产量;适用范围:1.扩增高GC含量、具有二级结构等复杂模板.2.高保真扩增,基因克隆,基因定点突变等.3.长片段扩增.
3、当然,也可以尝试对模板进行预变性,如加入适当的NaOH处理模板;
4、在PCR的时候加入一些增强剂,如甘油、DMSO等,也有助于打开复杂二级结构!