gc含量高pcr应该怎么扩
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:综合作业 时间:2024/05/15 07:55:33
gc含量高pcr应该怎么扩
1、TakaRA有一种酶叫做TakaRa LA Taq酶是专门对高GC含量的,当扩增具有复杂的二级结构 (GC rich等) 的模板或具有重复序列的模板时,使用GC Buffer进行PCR扩增将非常有效.里面有两种GC buffer,如以人基因组DNA为模板,可很好地扩增c-jun proto oncogene 1,255 bp (GC含量65%) 的DNA片段 (使用GC Buffer I,II).请先使用Buffer I,当使用Buffer I 不能扩增时,再试用Buffer II.
2、TransStart FastPfu Fly DNA Polymerase 特点:(1)新型热启动;(2)快速扩增;(3)高保真性;(4)强扩增能力;(5)高灵敏度;(6)高产量;适用范围:1.扩增高GC含量、具有二级结构等复杂模板.2.高保真扩增,基因克隆,基因定点突变等.3.长片段扩增.
3、当然,也可以尝试对模板进行预变性,如加入适当的NaOH处理模板;
4、在PCR的时候加入一些增强剂,如甘油、DMSO等,也有助于打开复杂二级结构!
2、TransStart FastPfu Fly DNA Polymerase 特点:(1)新型热启动;(2)快速扩增;(3)高保真性;(4)强扩增能力;(5)高灵敏度;(6)高产量;适用范围:1.扩增高GC含量、具有二级结构等复杂模板.2.高保真扩增,基因克隆,基因定点突变等.3.长片段扩增.
3、当然,也可以尝试对模板进行预变性,如加入适当的NaOH处理模板;
4、在PCR的时候加入一些增强剂,如甘油、DMSO等,也有助于打开复杂二级结构!
PCR 引物设计,在扩增一个基因片段,1200bp左右,编码区1000个bp左右.由于上游引物GC含量高,我想分两段扩增
追问引物设计第一次PCR的产物胶回收后用纯化吗,还是可以直接当做底物?目的基因3‘端GC含量太高,导致上下游引物Tm值差
PCR中的GC-clamps是什么意思
pcr 一段2000多bp的基因 引物设计时 条件怎么设 包括引物长度 gc含量等 因为我用软件设计时总是设不出来 可以
PCR扩增时,序列AT含量太高如何设计引物?
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请问各位大虾,PCR仪 仅仅设置一个循环,应该怎么设置,用2707thermal cycler.
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