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质粒的标记基因被破坏了,那怎么筛选

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:综合作业 时间:2024/05/28 05:28:43
质粒的标记基因被破坏了,那怎么筛选
导入目的基因的,标记基因被破坏,加入抗生素后不就死了吗…好的加分
对的 你说的对.抗生素标记基因若被破坏,其抗性产物不能表达 抗性不复存在.因此就不能按照抗生筛选了.
但一般构建成功的质粒 你导入目的基因都将是被插入多克隆位点的,不会破坏抗性基因.因此可依赖抗性筛选.
万一你的实验设计很特别, 那只好采用影印平板法进行反向筛选:采用具有抗性质粒的菌株作为出发菌株进行重组,先将重组菌株培养在无抗性平板上,等长出菌落以后,影印于另一个加抗生素的平板上培养,对比2个平板,查看无抗平板上的、没有抗性的菌落.同法反复筛选 则可.