蛋白质测定的原理
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:化学作业 时间:2024/05/11 18:48:44
蛋白质测定的原理
不同测试方法原理不一样,下面介绍一种常用的方法,凯氏定氮法的原理:
凯氏定氮法测蛋白含量:
根据凯氏定氮测得的氮含量和氮在蛋白质中的含量为1/6.25(即16%),故可计算得出蛋白质的含量.
凯氏定氮过程及化学反应如下:
浓硫酸在催化剂和高温作用下,将有机化合物消化,使其中的氮全部转换成硫酸铵,然后采用加碱(NaOH)蒸馏的方式,使硫酸铵中的铵(NH4+)以氨气的形式释放出来,再用加有指示剂的硼酸溶液吸收这些氨气,用酸滴定液滴定至终点,从而确定蛋白质中氮的含量.本方法创始人是丹麦化学家Johan Kjeldahl (1849-1900).其反应原理如下:
催化剂
消化:含氮有机物+H2SO4 ――――→(NH4)2SO4
420℃
蒸馏:(NH4)2 SO4 + 2NaOH→2NH3 ↑+Na2SO4 +2H2O
吸收:NH3 + H3BO3 →NH4BO2 + H2O
滴定:2NH4BO2 + H2O +H2SO4→(NH4)2SO4 +2H3BO3
凯氏定氮法测蛋白含量:
根据凯氏定氮测得的氮含量和氮在蛋白质中的含量为1/6.25(即16%),故可计算得出蛋白质的含量.
凯氏定氮过程及化学反应如下:
浓硫酸在催化剂和高温作用下,将有机化合物消化,使其中的氮全部转换成硫酸铵,然后采用加碱(NaOH)蒸馏的方式,使硫酸铵中的铵(NH4+)以氨气的形式释放出来,再用加有指示剂的硼酸溶液吸收这些氨气,用酸滴定液滴定至终点,从而确定蛋白质中氮的含量.本方法创始人是丹麦化学家Johan Kjeldahl (1849-1900).其反应原理如下:
催化剂
消化:含氮有机物+H2SO4 ――――→(NH4)2SO4
420℃
蒸馏:(NH4)2 SO4 + 2NaOH→2NH3 ↑+Na2SO4 +2H2O
吸收:NH3 + H3BO3 →NH4BO2 + H2O
滴定:2NH4BO2 + H2O +H2SO4→(NH4)2SO4 +2H3BO3
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