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粪便DNA提取技术最近在用预处理-酚/氯仿抽提技术进行粪便DNA提取实验,但总是无法提出DNA,在提完后跑电泳,电泳什么

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:综合作业 时间:2024/05/15 11:33:28
粪便DNA提取技术
最近在用预处理-酚/氯仿抽提技术进行粪便DNA提取实验,但总是无法提出DNA,在提完后跑电泳,电泳什么都没有跑出来,
麻烦高手注意下,是从粪便中,不是从组织或者血液,菌液之类的,那些我都能提出来,只有粪便中无法提到,
麻烦大侠,最好自己用过哪种方法给我介绍下,不要粘贴其他人用的,那些不一定准,我做的方法就是参考别人论文上发表的方法,结果不行。
采集新鲜粪便样品 ,使用 1 0 0 %乙醇保存.通过重复离心富集研究动物的肠道脱落细胞 ,并使用乙醇和双蒸水洗涤以除去抑制物.用 1 %的SDS快速裂解细胞 ,离心除去残渣后 ,向裂解液中加入蛋白酶进行消化.消化结束后使用等体积的酚 /氯仿抽提 ,乙醇沉淀DNA.用双蒸水溶解粪便DNA后 ,使用PCR产物纯化试剂盒对粪便DNA进行纯化.电泳检测结果显示 ,从乙醇保存的大、小熊猫粪便样品中抽提到高质量的粪便DNA.对线粒体控制区、细胞色素b基因、 1 2SrRNA基因的PCR扩增反应以及测序结果也证实了样品保存方法和DNA抽提方法可靠而高效.